|
活性氧 (ROS) 是具有化学活性的含氧分子，是作为细胞代谢的副产品自然产生的。 在生理条件下，ROS 水平受到仔细调节，它们在正常细胞信号转导、细胞周期、基因表达和体内平衡中充当信使。
当过量产生时，ROS 有可能导致许多有害事件。 在高浓度下，ROS 会在细胞中诱导氧化应激，从而导致细胞大分子（如核酸、膜脂和细胞蛋白质）的后续损伤。 这些生物分子的氧化损伤可引发细胞凋亡，与衰老有关，并与多种疾病、癌症和神经退行性疾病以及糖尿病和炎症的发病机制有关。
由于其破坏作用，细胞有几个精心调节的系统来管理过量的 ROS。 研究得充分的系统是谷胱甘肽-抗坏血酸循环，它使用 NADH 和 NADPH 作为电子供体，将 H2O2 解毒为 H2O。 其他系统包括酶，例如超氧化物歧化酶，其催化超氧阴离子 (O2-) 歧化为 O2 或 H2O2，以及过氧化氢酶，其催化 H2O2 分解为 H2O 和 O2。
ROS的类型
大多数细胞 ROS 作为线粒体氧化磷酸化的副产物或作为氧化还原酶和金属催化氧化的中间体。 由于氧原子在其外层电子壳的不同轨道上包含两个不成对的电子，因此容易形成自由基。 通过添加电子连续还原氧导致形成许多 ROS，包括超氧阴离子 (O2-)、过氧化氢 (H2O2)、羟基自由基 (•OH)、次氯酸 (HOCl)、过氧亚硝酸根阴离子 (ONOO) -) 和一氧化氮 (NO)。
过氧化氢
过氧化氢 (H2O2) 是一种活性氧代谢副产物，是许多氧化应激相关状态的关键调节剂。 它参与了许多与哮喘、动脉粥样硬化、糖尿病血管病变、骨质疏松症、神经变性和唐氏综合症有关的生物事件。
细胞内过氧化氢探针
| |
活性氧 DCFH-DA |
活性氧 二氢罗丹明 |
OxiVision 蓝色 |
OxiVision 绿色 |
| 原理 |
酯酶裂解二乙酸酯基团产生 DCFH，DCFH 被 H2O2 氧化成 DCF 并在激发时发出绿色荧光 |
H2O2 氧化生成罗丹明 123，激发后发出蓝色荧光 |
OxiVision 探针被细胞内的 H2O2 氧化。 激发时产生荧光。 |
| Ex/Em (nm) |
504/525 |
507/527 |
405/450 |
497/516 |
| 滤波片 |
FITC |
FITC |
DAPI |
FITC |
| 活细胞 |
适用 |
| 成像 |
适用 |
| HCS |
适用 |
| 流式细胞术 |
适用 |
| 规格 |
25 mg |
10 mg |
Kit (100 Tests) |
Kit (100 Tests) |
| 货号 |
15204 |
15206 |
11504 (Imaging)
11505 (Flow) |
11503 (Imaging)
11506 (Flow) |
羟基自由基
细胞内羟基自由基 (•OH) 的检测对于理解适当的细胞氧化还原调节及其失调对各种病理的影响至关重要。 羟基自由基是活性氧 (ROS) 中的一种，可与其他分子高度反应以实现稳定性。 一般而言，羟基自由基被认为是氧化代谢的有害副产物，可对生命系统造成分子损伤。 它的平均寿命为 10-9 纳秒，几乎可以与所有生物分子发生反应，例如核 DNA、线粒体 DNA、蛋白质和膜脂。
羟基自由基检测
活细胞的细胞内•OH检测
表1. 细胞内 ROS 选择指南
| 活性氧种类 |
ROS Brite 570 |
ROS Brite 670 |
ROS Brite 700 |
ROS Brite HDCF |
Amplite ROS Green |
Amplite ROS Red |
| 过氧化氢 (H2O2) |
+ |
+ |
+ |
+++ |
+++ |
+++ |
| 羟基自由基 (•OH) |
++ |
++ |
++ |
+ |
+ |
+ |
| 叔丁基过氧化氢 (TBHP) |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
| 次氯酸 (HOCl) |
- |
+ |
++ |
- |
+ |
- |
| 超氧阴离子 (O2•-) |
+ |
++ |
++ |
- |
- |
- |
| 一氧化氮 (NO) |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
| 过氧亚硝酸根阴离子 (ONOO-) |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
| 货号 |
22902 |
22903 |
16004 |
16053 |
|
22901 |
表2. ROS 选择性探针和检测试剂盒
| 活性氧物种 |
OxiVision Green |
OxiVision Blue |
MitoROS 520 |
MitoROS 580 |
MitoROS OH580 |
| 过氧化氢 (H2O2) |
+++ |
+++ |
- |
- |
- |
| 羟基自由基 (•OH) |
- |
- |
- |
- |
+++ |
| 叔丁基过氧化氢 (TBHP) |
- |
- |
- |
- |
- |
| 次氯酸 (HOCl) |
- |
- |
- |
- |
- |
| 超氧阴离子 (O2•-) |
- |
- |
+++ |
+++ |
- |
| 一氧化氮 (NO) |
- |
- |
- |
- |
- |
| 过氧亚硝酸根阴离子 (ONOO-) |
- |
- |
- |
- |
- |
| 货号 |
|
|
16060 |
|
|
表3. ROS生成方法
| 活性氧 (ROS) |
ROS生成方法 |
| H2O2 |
100 µM of H2O2 |
| •O2- |
100 µM of KO2 |
| ¹O2 |
100 µM of 3-(1,4-dihydro-1,4-epidioxy-1-naphthyl)propionic acid |
| -OCL |
3 µM (final) of -OCl |
| • OH |
100 µM of ferrous perchlorate (II) and 1 mM of H2O2 |
| ONOO- |
3 µM (final) of ONOO- |
| NO |
100 µM of 1-hydroxy-2-oxo-3-(3-aminopropyl)-3-methyl-1-triazene |
| ROO• |
100 µM of 2,2'-azobis(2-amidinopropane), dihydrochloride (AAPH) |
| 自氧化剂 |
在荧光光源下 2.5 小时 |
百萤生物是美国AAT Bioquest中国区域代理商，为您提供AAT Bioquest优质的产品、详尽的技术和前沿的资讯，欢迎来电咨询！
|
ROS, 活性氧, H2O2, O2-, OCL, OH, 百萤生物, AAT Bioquest
