未来已来——光谱流式大放异彩
English title: Spectral flow cytometry
Published on 2019-05-30
流式细胞仪，一项可以推动医学、生命科学快速发展的发明，与传统的免疫荧光、免疫印迹相比，流式的优点很多：
1.阳性细胞比例的确定2.同时检测多种蛋白3.简便的蛋白定量操作4.速度与灵敏度极高。
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流式细胞仪操作原理
流式细胞仪也却是一种让人既爱又恨的仪器。爱在它可以自动分析、筛选细胞，快速测量、存贮、显示悬浮在液体中
的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量，并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选
出来；恨就恨在荧光补偿实在是一个非常麻烦的过程。文献中提到过，哺乳动物细胞的自发荧光来源很复杂，如烟酰胺腺
嘌呤二核苷酸 NAD，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸NADPH，黄素等。而且除了自发荧光，细胞固定液、染液也有可能会导
致荧光改变。这些杂七杂八的荧光混在一起对各个波段的荧光检测有很大的影响，再加上这些自发荧光的光谱通常都很宽，
与大部分荧光染料光谱重合，对荧光补偿来说更是难上加难。
哪里有困难，哪里就有解决办法，近听到公司大牛提到光谱流式细胞仪已超越传统流式，可以解决荧光补偿的问题，
可能在未来成为流式的主导，我也是一个激灵，想起自己当初做实验时的满面愁容，我怀着激动的心情，详细的了解了一
下光谱流式。（注：公司不售流式，仅做科普，不是广告。）
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| 采用棱镜模组分光和专利技术 32 联排 PMT，实现 420-800nm 波长范围内光谱荧光信号检测。该技术的实现也突破了传统流式的诸多限制，标志着光谱流式时代的到来！（图片来自网络） |
常规流式与光谱流式对比
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图片来自流式中文网
如何才能破解自发荧光干扰？
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| 全光谱流式细胞仪实现对细胞自发荧光从 420nm-800nm 波长范围光谱扫描，软件可以帮助我们快速的找出并计算得到不同的自发荧光的光谱线。系统将这些自发荧光与染料荧光同时分析；利用自发荧光光谱与染料荧光光谱的差异，结合统计学算法，完成了对染料荧光和自发荧光的拆分。（图片来自网络） |
说到这里，许多人想，传统流式都用了这么多年了，各种方法早已烂熟于心了，我不想再重新尝试了，这让我不禁想起
之前看到的一段话： 多色流式的荧光补偿概念根深蒂固，很多用户向光谱流式转化看起来太痛苦了。 我不断提出这样的问
题：“当我们有机会去除流式细胞仪的这个邪恶的Bug时，为什么我们还要花费这么多时间和精力专注于补偿呢？” 一个又一个
教程，一篇又一篇Paper，一个又一个问题。痛苦难道是流式细胞术的必要组成部分吗？——J. Paul Robinson（光谱流式发
明者）。科学使人类进步，同时人类也推动科学进步，做出新的尝试，新的改变，未尝不是一种新的进步呢？改变吧，科研不
加班！
百萤生物，是美国AAT Bioquest的中国代理商，出售各类荧光探针/试剂盒，提供各类定制、技术服务，产品涉及：细胞
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