百萤教您选择正确的ROS探针（一）
百萤教您选择正确的ROS探针，正确的选择让实验不再迷茫。活性氧（ROS）是化学反应性的含氧化学物质，其作为细胞代谢的副产物而产生。 在动物细胞中，ROS的产生通常发生在线粒体中。 在植物细胞中，ROS也可以在叶绿体中产生。 近，已显示ROS在过氧化物酶体和各种细胞类型的质膜氧化酶中产生。
当过量产生时，ROS一直被认为会导致细胞大分子如DNA，脂质和蛋白质的损伤。 从整体上讲，这是由细胞的氧化应激状态表示的。 这种应激状态与细胞过程如细胞凋亡有关，而且在宏观上更像是在许多人类疾病的发病机制中发挥作用。
由于其具有破坏性的影响，细胞有几个精心调节的系统来管理过量的ROS。 充分研究的系统是谷胱甘肽 - 抗坏血酸循环，其使用NADH和NADPH作为电子供体将H2O2解毒为H2O。 其他系统包括酶，例如超氧化物歧化酶，其催化超氧阴离子（O 2- ）歧化成O 2或H 2 O 2，和过氧化氢酶，其催化H 2 O 2分解成H 2 O和O 2。
ROS对细胞的利与弊导致它们早已被广泛的研究了，但是近研究已经研究了ROS在细胞信号传导中的作用。 在控制量方面，ROS已被证明可调节基因活化。 然而，出现这种情况的具体机制仍有争议。ROS可能与特殊受体结合，这些受体启动信号级联，导致基因调控。 ROS也可能通过调节蛋白质磷酸化直接修饰这种信号级联中的蛋白质。
既然ROS对细胞作用如此之大且类型繁多，那么如何才能正确的选择探针对ROS进行检测呢？
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| 检测目标 | 作用目标 | 探针 | 货号 | 原理 |
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过氧化氢（H2O2） |
活细胞 | 15204 |
探针进入细胞，其中酯酶裂解双乙酸酯基团。 然后DCFH被过氧化氢氧化成DCF并在激发时发出绿色荧光 |
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| 15206/15207 |
探针被动地渗透细胞膜。 通过过氧化氢氧化产生罗丹明123，其在激发时发出蓝色荧光 |
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| 11504/11505 |
探化氢氧化，激发时产生荧光针渗透细胞并被细胞内过氧 |
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| 11503/11506 | ||||
| 细胞提取物 | 11501 |
过氧化氢依赖氧化ADHP（同义词：10-乙酰基-3,7-二羟基吩恶嗪，Amplex®Red）通过辣根过氧化物酶（HRP）将ADHP转化为试卤灵。 可以使用比色法或荧光法检测试卤灵 |
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| 11500 | ||||
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Amplex™红色过氧化氢/过氧化物酶检测试剂盒 |
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辣根过氧化物酶（HRP）对过氧化氢IR的过氧化氢依赖性氧化产生活化的探针。 激发会发出近红外荧光信号 |
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| 11502 |
| 检测目标 | 作用目标 | 探针 | 货号 | 原理 |
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超氧阴离子（O2-） |
活细胞/细胞提取物 |
21259 |
通过转化为光泽精阳离子基团光泽精。 光泽精阳离子自由基与超氧阴离子反应生成二氧杂环丁烷中间体，其分解为N-甲基吖啶酮。 N-甲基吖啶酮中的高能电子降低能量状态，导致发光 |
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21150 |
超氧阴离子的氧化导致激发的电子态。 在衰变到基态电子配置时，光子作为发光释放 |
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11050 |
超氧化物依赖性酶催化鲁米诺的氧化导致发光 |
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15200 |
探针被动地渗透完整细胞并定位于线粒体中。 通过超氧化物氧化探针。 活化的探针与DNA嵌入，并在激发后发荧光。 DNA结合是强荧光信号所必需的。 对于氢化乙啶，活化的探针是乙锭（即与DNA染色溴化乙锭相同的活性物质） |
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MitoSox™ Red |
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16052/22970/22971 |
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16060 |
探针容易通过完整的细胞膜，然后定位在线粒体中。 然后通过超氧化物氧化。 激发后，它会释放出绿色荧光 |
| 检测目标 | 作用目标 | 探针 | 货号 | 原理 |
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羟基（•OH） |
活细胞/细胞提取物 |
16055 |
探针能够自由地进入活细胞，其中活细胞被游离羟基特异性氧化。 激发后，氧化的探针发出红色荧光 |
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总ROS |
活细胞/细胞提取物 |
16000/22902 |
探针被动地渗透完整的细胞膜。 一旦进入细胞内，探针就被细胞内的ROS氧化。 探针也可以在溶液中被ROS氧化，用于细胞提取物测定。 激发后，探针发出荧光信号 |
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16002/22901 |
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16004/22903 |
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22900 |
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