荧光检测技术的优势
English title: Advantages of fluorescence detection technology
Published on 2019-07-01
荧光检测技术的优势在于,高灵敏度、低干扰、高通量等,AAT Bioquest生产的荧光检测试剂及试剂盒,为您提供好的技术服务。荧光是一种波长的光能分子吸收,另一种波长(通常更长)下的瞬时发射。光在大约10-15秒内被分子吸收,使电子被激发到更高的电子状态。电子保持在激发态约10-8秒,然后返回基态,假设所有多余的能量不会因与其他分子的碰撞而损失。在电子返回其基态时发射能量。由于分子在发射之前的能量损失有限,所以发射的光总是具有比吸收的光更长的波长。该过程如图1所示。
图1荧光的产生的Jablonski图
荧光化合物具有两个特征光谱:激发光谱(吸收的光的波长和量)和发射光谱(发射的光的波长和量)。能量的吸收和辐射(发射)都是荧光过程中特定分子的独特特征。与其他分析模式相比,荧光测量具有极高的灵敏度,高特异性,简单性和低成本。荧光测量比吸光度测量灵敏10-1000倍。它们被广泛用于各种环境,工业和生物技术应用的强大技术。它们是定量和定性分析的有价值的分析工具。
- 高灵敏度:检测限度很大程度上取决于分子的性质和被测量的周围环境。对于大多数分析物,ppb(十亿分之一)或甚至ppt(万亿分之一)检测限是可以实现的。这种极高的灵敏度即使使用小样本荧光材料也可以可靠地检测
- 低干扰:分光光度测量光吸收的分光光度很容易产生干扰问题,因为许多材料吸收光线,因此难以在复杂基质中分离目标分析物。荧光测量具有高度特异性,不易受干扰,吸收和发射光(荧光)的材料要少得多
- 输出范围广:荧光输出在很宽的范围内与样品浓度呈线性关系。荧光测量可以使用三到六个浓度,而无需样品稀释或样品池的修改。
- 高通量:荧光测量是一种相对简单的分析技术。其高灵敏度和低干扰减少甚至了样品制备程序,这些程序通常需要在分析前浓缩分析物或去除样品中的干扰。大多数荧光测定可以自动化进行高通量筛选应用。
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