线粒体（Mitochondria）

线粒体是一种独特的膜结合细胞器，存在于所有真核细胞中。 作为 ATP 生产和细胞能量供应的主要场所，线粒体的独特方面（包括称为 mDNA 的独立遗传物质、其自身的蛋白质合成机制和严格调控的膜电位电荷梯度）使其成为重要的研究课题。 

百萤提供广泛的成像技术，用于研究活细胞和固定细胞中的线粒体形态和功能。

用于活细胞线粒体成像的 MitoLite 染料

MitoLite 染料是一系列可渗透细胞的阳离子染料，用于标记活细胞中的线粒体。在微摩尔浓度 (µM) 下，MitoLite 染料被动扩散穿过活细胞膜，并通过线粒体膜电位 (ΔΨm) 梯度选择性地积聚在活性线粒体中。由于线粒体膜电位的崩溃（去极化）导致细胞死亡过程中染色会丢失，因此 MitoLite 染料也可用于检测细胞活力。 MitoLite 染料的光谱特性范围从蓝色到近红外，以适应与其他荧光探针的多重检测或固定后用于共定位研究。 MitoLite 染料固色后的保留率各不相同，MitoLite Blue FX490 等染料固色后保留良好，而 MitoLite Green FM 等染料在固色后丢失。 MitoLite 染料是此处单独提供的 Cell Navigator 线粒体染色试剂盒的主要成分。

MitoLite 探针的特点：

1. 1.通过 ΔΨm 梯度选择性地积聚在活跃的线粒体中
   2.具有高信噪比的异常明亮的荧光
   3.更高的光稳定信号
   4.无需水洗即可成像
   5.多种波长选项，可与其他荧光探针进行多重分析
   6.适用于增殖和非增殖细胞，以及悬浮细胞和贴壁细胞

MitoLite Blue FX490
(22674)

MitoLite Green FM
(22695)

MitoLite NIR FX690
(22690)

表1. 用于标记活细胞线粒体的可用 MitoLite™ 染料。

CytoFix Red 可固定线粒体染色剂

即使在固定过程中线粒体膜电位丢失后，CytoFix Red 线粒体染料增强的细胞保留能力仍能保留其线粒体局部荧光。 这种染料产生的荧光信号很好地保留在溶酶体中，便于长期跟踪线粒体。 CytoFix Red 线粒体染料可与其他荧光偶联物和其他细胞器染料一起用于多色分析。 它可用于悬浮细胞和贴壁细胞，并可轻松适应各种荧光平台。

CytoFix Red 的特点：

1. 1.线粒体染色效率高
   2.固定后长期保留（1 周或更长时间）
   3.以少的时间进行标记协议

图2. HeLa 细胞在 96 孔黑色透明底板中用 CytoFix MitoRed 染色的荧光图像。 在室温下用 4% 甲醛溶液固定 20 分钟之前（左）和之后（右）获得图像。 使用带有 Cy3/TRITC 滤光片的荧光显微镜对细胞进行成像。

表2. CytoFix Red 固定溶酶体染色