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吲哚菁绿(Indocyanine Green)

English title: Indocyanine Green

吲哚菁绿 (ICG) 是一种带负电荷的三碳菁染料,因其低毒性和红外荧光发射而被广泛利用。 ICG 的毒性很小,这是因为它与血浆蛋白的结合,将其限制在血管隔室中,在那里它被肝脏迅速代谢并仅由肝脏和胆管排出。 ICG 和 ICG 衍生物可用作体内分子成像探针。 它们的红外荧光发射可穿透组织几毫米,以促进深层组织和小动物体内成像。 ICG 用于医学诊断以确定心输出量、肝功能和肝血流量以及眼科血管造影术。 此外,ICG 已与多种抗体偶联,用于癌细胞和肿瘤靶向。



光谱性质

激发光线:  785 nm
滤波器组: Cy7
大激发光: 788nm
大发射光: 813nm
消光系数: 230,000cm-1 M -1
量子产率: 0.04

图1:吲哚菁绿-OSU(货号182)的吸光度和发射大值



iFluor 790 - ICG 和 Alexa Fluor® 790 的替代品

iFluor 790 是亮的近红外染料,其光谱类似于吲哚菁绿 (ICG)、Alexa Fluor® 790 和 IRDye® 800 染料。 iFluor 790 染料具有出色的水溶性和耐盐性、对 pH 不敏感的荧光和产生光稳定的信号,非常适合高密度标记应用、蛋白质印迹和免疫细胞化学 (ICC) 分析以及蛋白质阵列、显微镜检查、体内成像和红外光学探针的开发。 iFluor 790 的发射与常用的远红荧光团如 Cy5(货号 151)、Cy7(货号 161)或别藻蓝蛋白(ReadiUse APC,货号 2503)完全分离,便于多色分析。 iFluor 790 适用于小动物体内成像应用或其他需要 NIR 检测的成像应用,例如使用 LI-COR® Odyssey® 红外成像系统的双色蛋白质印迹应用。

iFluor 790 提供不同的活性染料形式和 ReadiLink 标记试剂盒,可用于标记具有明亮红外荧光的蛋白质、抗体、肽和核苷酸。 还提供与各种抗体、链霉亲和素和扩增底物偶联的 iFluor 790 染料,这些染料针对细胞标记和检测进行了优化。图2.将 HeLa细胞固定在4%甲醛中,然后用iFluor 350鬼笔环肽染色。


表1.iFluor 790 - ICG 和 Alexa Fluor® 790 的替代品

荧光染料 Ex max Em max ε Φ CF260 nm CF280 nm
iFluor 790, SE 786 nm 811 nm 250,000 0.13 0.1 0.09
ICG-OSu 788 nm 813 nm 230,000 0.04 0.112 0.072
Alexa Fluor® 790, NHS Ester 784 nm 814 nm 260,000 暂无 0.09 0.08
IRDye® 800 CW NHS Ester 774 nm 789 nm 240,000 暂无 0.03 0.03


吲哚菁绿衍生物

吲哚菁绿荧光染料与红外荧光成像相结合,明显提高了检测灵敏度。它的光谱在700 到 1000 nm 之间的红外波长范围内,由于该区域生物分子的吸收小,光散射和自发荧光都大大减少。 因此产生的低背景干扰和高信噪比提高了检测灵敏度。

我们提供多种磺化和非磺化以及 PEG 修饰的吲哚菁绿衍生物和活性染料,用于标记蛋白质、抗体、肽和其他具有红外荧光的生物分子。 可用的吲哚菁绿反应形式包括:

  • OSu:用于标记伯胺和仲胺 (-NH2)。
  • 马来酰亚胺:用于标记含有游离巯基 (-SH) 的生物分子。
  • 胺:用于标记含有羰基(例如醛或羧基)的生物分子。
  • 炔烃和叠氮化物:用于通过点击化学标记生物分子。
  • 酰肼:用于通过席夫碱化学标记生物分子。

非磺化吲哚菁绿

非磺化吲哚菁绿的衍生物由于其极低的水溶性,非常适合在有机介质中的应用。 这些衍生物需要使用有机共溶剂,例如 5-20% DMF 或 DMSO,以进行有效的生物分子标记。 当用吲哚菁绿衍生物标记生物分子时,首先将染料溶解在有机溶剂中,然后加入到生物分子在适当的水性缓冲液中的溶液中。


磺化吲哚菁绿

磺化吲哚菁绿衍生物含有磺基以促进染料在水溶液中的溶解。 添加带电荷的磺酸盐基团可减少游离染料分子和重标记偶联物的聚集。 磺化吲哚菁绿染料高度水溶性,标记时不需要使用有机助溶剂。


PEG 修饰的吲哚菁绿

PEG 修饰(或 PEG 化)吲哚菁绿衍生物包含由聚(乙二醇)或 PEG 组成的间隔臂。 该间隔臂通过使具有不带电荷的反应基团的吲哚菁绿衍生物可溶或具有带电反应基团的那些更易溶来增加溶解度。 此外,吲哚菁绿染料的 PEG 修饰可以增加吲哚菁绿染料的疏水性并显着减少非特异性结合。

表2.吲哚菁绿和吲哚菁绿衍生物的物理和化学性质

产品名称 Ex/Em (nm) 分子量 反应物/反应基团 修饰
吲哚菁绿 CAS 3599-32-4 788/813 774.96 血浆蛋白 非磺化
吲哚菁绿ICG 酸 788/813 844.98 胺 (-NH2) 和 -OH 非磺化
吲哚菁绿ICG炔烃 788/813 768.03 点击化学 磺化
吲哚菁绿ICG amine 788/813 1001.08 羰基 (-COOH) 非磺化
吲哚菁绿ICG叠氮化物 788/813 799.05 点击化学 磺化
吲哚菁绿ICG-ATT 788/813 760.49 胺 (-NH2) 非磺化
ICG酰肼 788/813 973.04 席夫碱化学 磺化
吲哚菁绿ICG 马来酰亚胺 788/813 853.09 巯基或硫醇 (-SH) 非磺化
吲哚菁绿ICG-Osu 788/813 828.03 胺 (-NH2) 非磺化
吲哚菁绿ICG Xtra-Osu 788/813 1232.62 胺 (-NH2)


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