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细胞活力(Cell Viability)

English title: Cell Viability

细胞活力通常与细胞健康以及细胞群成功存活和发挥功能的能力相对应。细胞活力的检测可用于将细胞行为与群体中活细胞的数量相关联,优化培养维持细胞群体的生长条件,检测毒理学,或评估潜在候选药物的功效。 定义细胞活力的参数可以多种多样,从细胞膜的完整性或细胞内酶的活性到线粒体的膜电位或细胞群的氧化还原电位(表 1)。

 

确定细胞活力的方法

染料排除试验

使用细胞不可渗透染料区分活细胞和死细胞。 死细胞受损的细胞膜允许细胞不可渗透的染料流入并被染色,而活细胞则不会。 使用台盼蓝或其他细胞不可渗透的 DNA 结合染料来确定您群体中活细胞的数量。

 

染料还原试验

氧化还原活力指示剂通过将细胞代谢与群体中活细胞的百分比相关联。 使用显色和荧光指示剂、WST-8 和刃天青来检测细胞代谢活动。 WST-8 和刃天青的低细胞毒性便于需要更长时间孵育的分析。

 

荧光酯酶底物

细胞渗透性酯酶底物通过检测细胞酶活性和膜完整性来确定细胞活力。 在扩散到活细胞中后,细胞内酯酶将所述底物水解成在细胞内保留良好的荧光化合物。 产生的信号强度与活细胞的数量成正比,可以用荧光仪器进行检测。 

 

线粒体膜电位

线粒体膜电位 (ΔΨm) 的丧失是细胞凋亡早期阶段的特征,可以使用电位探针进行检测,以间接检测细胞活力。 这些阳离子探针很容易通过 ΔΨm 隔离和染色活性线粒体,以识别活细胞。

 

表1. 评估细胞活力和细胞毒性的常用参数和方法

参数 方法 试剂示例
细胞膜完整性 使用细胞免疫染料来评估膜的完整性。 膜受损的死细胞很容易吸收这些染料并被染色
细胞内酶活性 使用通过细胞内酯酶活性在活细胞中被荧光的细胞渗透性染料

线粒体膜电位 (ΔΨm)

使用通过 ΔΨm 在线粒体中积累的细胞渗透性染料来识别活细胞。 ΔΨm 的损失是细胞凋亡和死细胞的特征
细胞代谢 使用细胞不可渗透的四唑盐检测细胞代谢活动
检测整个细胞群的细胞氧化还原电位

使用生物发光检测来测量 ATP 和 ADP。 ADP/ATP 比率的变化已被用于区分不同的细胞死亡和活力模式


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