死细胞核染料 TWO-PRO 3 相当于TO-PRO 3 CAS 157199-63-8
Ex (nm) | 642 | Em (nm) | 657 |
分子量 | 671.42 | 溶剂 | DMSO |
存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
TWO-PRO -3 是一种化学成分与 TO-PRO®-3 相同的染料,后者是 Invitrogen 公司的注册商标。TWO-PRO™-3 是一种具有类似于 Cy® 5 染料的远红外荧光的碳氰化合物二聚体。它不易穿透细胞膜,因此可以清晰地与荧光素和罗丹明类染料区分开来,用作核酸对照染色和死细胞指示剂。在没有核酸的情况下它不会发光,但与 DNA 结合后会产生非常明亮的荧光信号。TWO-PRO™-3 在培养细胞和石蜡切片中提供强烈且选择性的核染色。同时使用能穿透细胞的 Nuclear Green™ LCS1 染料和不能穿透细胞的 TWO-PRO™-3 可以用来评估细胞的活性。TWO-PRO™-3 和 Nuclear Green™ 的消光系数远高于与 DNA 结合的碘化丙啶。
适用仪器
荧光显微镜 | |
Ex: | Cy5滤波片 |
Em: | Cy5滤波片 |
推荐孔板: | 黑色壁/透明底 |
溶解方案(溶剂以说明书为准)
0.1 mg | 0.5 mg | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
1 mM | 148.938 µL | 744.69 µL | 1.489 mL | 7.447 mL | 14.894 mL |
5 mM | 29.788 µL | 148.938 µL | 297.876 µL | 1.489 mL | 2.979 mL |
10 mM | 14.894 µL | 74.469 µL | 148.938 µL | 744.69 µL | 1.489 mL |
样品实验方案
工作溶液配制
TWO-PRO -3 工作溶液
在含20 mM Hepes缓冲的Hanks缓冲液(HH缓冲液)或您选择的其他缓冲液中,制备TWO-PROTM-3的工作液。
注意:在初始实验中,最好尝试几种染料浓度以确定产生结果的最佳浓度。高染料浓度往往会导致其他细胞结构的非特异性染色。
操作步骤
注意:以下实验步骤可用于大多数细胞类型。生长基质、细胞密度、其他细胞类型及生长因子的存在可能会影响染色效果。玻璃容器上残留的洗涤剂也可能影响许多组织的染色,并会使溶液中含有或不含细胞都出现强烈荧光物质。
1.根据需要培养和处理细胞。
2.除去细胞培养基。
3.将 TWO-PRO-3 工作溶液(1 至 10 µM)添加到细胞(悬浮细胞或贴壁细胞)中,并将细胞染色 15 至 60 分钟。
4.除去染料工作溶液并添加 HH 缓冲液或您选择的缓冲液。
5.使用 Cy5 滤光片通过荧光显微镜分析细胞染色。
试剂应用文献
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