磷酸基团近红外荧光染料 SunRed
| Ex (nm) | 653 | Em (nm) | 661 |
| 分子量 | 422.20 | 溶剂 | Water |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
磷酸基团近红外荧光染料 SunRed是美国AAT Bioquest生产的用于磷酸的试剂盒，磷酸酶催化的太阳红磷酸盐（SRP）的水解产生可以用633nm激光激发并且发射~660nm的太阳红荧光团。虽然Sun Red很容易在633 nm处激发，红色发射约为660 nm，但SRP在633 nm处的吸收非常小，没有红色发射，使SRP成为敏感的NIR磷酸酶传感器之一。请不要使用DMSO制备储备溶液，因为它会显着增加分析背景。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的磷酸基团近红外荧光染料 SunRed。
适用仪器
| 荧光酶标仪 | |
| Ex: | 620nm |
| Em: | 660nm |
| Cutoff: | 640nm |
| 推荐孔板: | 纯黑色孔板 |
样品实验方案
简要概述
1.在Tris缓冲液（50μL）中制备并添加10 - 50μMSunRed 磷酸盐
2.添加碱性磷酸酶标准品和/或测试样品（50μL）
3.在室温或37°C孵育30至120分钟
4.监测Ex / Em = 620/660 nm处的荧光强度（截止640 nm）
溶液制备
1.储备溶液
所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 SunRed 磷酸盐原液：
在无菌水中制备2至10 mM的SunRed 磷酸盐储备液。 注意：应立即使用原液。 注意：不要使用DMSO，ETOH或METH制备储备溶液，因为它会显着增加分析背景。 注意：避光。
2.工作溶液
SunRed 磷酸盐工作溶液（2X）：
在实验当天，将SunRed 磷酸盐固体溶解在无菌H2O中，或在室温下解冻等份的SunRed 磷酸盐储备溶液。 在100 mM Tris缓冲液或pH 8至9的缓冲液中制备10至50μM的2X工作溶液。建议使用SunRed 磷酸盐终浓度5至25μM测定溶液中的碱性磷酸酶活性。
样品分析
1.在碱性磷酸酶标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50μL2XSunRed™磷酸盐工作溶液，使总碱性磷酸酶测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，在每个孔中加入25μL样品和25μL2XSunRed™磷酸盐工作溶液。
2.在所需温度下孵育反应30至120分钟，避光。
3.用荧光板读数器监测Ex / Em = 620 / 630nm处的荧光增加（在640nm处截止）。
参考文献
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