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蛋白酶体20S荧光底物(Suc-LLVY)2R110

英文名称:(Suc-LLVY)2R110
产品参数
Ex (nm)500Em (nm)522
分子量1507.72溶剂DMSO
存储条件在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

蛋白酶体20S荧光底物(Suc-LLVY)2R110是美国AAT Bioquest生产的荧光底物蛋白酶体的主要功能是通过蛋白水解(一种破坏肽键的化学反应)降解不需要的或受损的蛋白质。 蛋白酶体降解途径对于许多细胞过程是必不可少的,包括细胞周期,基因表达的调节和对氧化应激的反应。 该途径中常见的蛋白酶体形式是蛋白酶体26S,一种ATP依赖性蛋白水解复合物,其含有一个20S(700-kDa)核心颗粒结构和两个19S(700-kDa)调节帽。 20S核心包含三种主要的蛋白水解活性,包括胰凝乳蛋白酶样,胰蛋白酶样和半胱天冬酶样活性。 它负责细胞凋亡,DNA修复,内吞作用和细胞周期控制所涉及的关键蛋白的分解。

AAT Bioquest提供一组R110底物,用于监测蛋白酶体在不同亚位点的蛋白酶活性,即(i)亚位点:1c,Z-LLE-R110; 2c,Ac-KQL-R110; 5c,Ac-WLA-R110; 1i,Ac-PAL-R110; 2i,Ac-KQL-R110; 5c,Ac-WLA-R110和Suc-LLVY-R110;和5i,Ac-ANW-R110。通过分别使用490nm和520nm的激发和发射波长监测R110随时间的释放来测量蛋白酶活性。我们还提供Suc-LLVY-AMC,非荧光基板产生亮蓝色荧光AMC产品,其Ex / Em = 351 / 430nm,并且可以使用DAPI滤光片组轻松检测。通常,R110底物比基于AMC-,AFC-或4-硝基苯胺的底物灵敏得多。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的蛋白酶体20S荧光底物(Suc-LLVY)2R110。 

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适用仪器


荧光酶标仪  
Ex: 498nm
Em: 520nm
推荐孔板: 纯黑色孔板
实验方案

操作方法

以下说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

1.在DMSO中制备5至10 mM的储备溶液。

 

2.准备2X蛋白酶体底物(20至50μM)测定溶液,如下所示:

25至50uL底物储备液(10 mM)

100ul DTT(1M)

400uL EDTA(100 mM)

10mL Hepes Buffer(25mM),pH = 7.4

 

3.将等体积的蛋白酶体标准品或样品与 2X 荧光蛋白酶体底物测定溶液(来自步骤 1)混合,并在室温下孵育溶液至少 1 小时。

 

4.监测荧光使用荧光酶标仪。

 

参考文献

Diabetogenic agent alloxan is a proteasome inhibitor
Authors: Wenjuan Zhou, Lingling Wei, Ting Xiao, Chunyou Lai, Min Peng, Lingli Xu, Xiangwei Luo, Shaoping Deng, Fengxue Zhang
Journal: Biochemical and Biophysical Research Communications (2017): 400--406

Delineation of molecular pathways involved in cardiomyopathies caused by troponin T mutations
Authors: Jennifer E Gilda, Xianyin Lai, Frank A Witzmann, Aldrin V Gomes
Journal: Molecular & Cellular Proteomics (2016): 1962--1981

Diclofenac induces proteasome and mitochondrial dysfunction in murine cardiomyocytes and hearts
Authors: Rajeshwary Ghosh, Sumanta K Goswami, Luis Felipe BB Feitoza, Bruce Hammock, Aldrin V Gomes
Journal: International Journal of Cardiology (2016): 923--935

Advanced-glycation-end-product-induced formation of immunoproteasomes: involvement of RAGE and Jak2/STAT1
Authors: Stefanie Grimm, Christiane Ott, Melanie Hörlacher, Daniela Weber, Annika Höhn, Tilman Grune
Journal: Biochemical Journal (2012): 127--139