链霉亲和素-Xtra IF488缀合物
Ex (nm) | 491 | Em (nm) | 516 |
分子量 | ~52000 | 溶剂 | Water |
存储条件 | 避免光照, 在2-8度冷藏保存 |
产品货期
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产品优势
1.灵活性强:同一生物素化抗体可搭配不同标记的链霉亲和素(荧光、酶、纳米颗粒)
2.特异性高:生物素-链霉亲和素结合几乎不可逆,背景低。
3.稳定性好:极端物理化学条件下(80°C、SDS、极端pH)稳定性好
适用范围
用于蛋白质、蛋白质基序、核酸检测
产品介绍
链霉亲和素偶联物常与生物素偶联物联合使用,可广泛检测蛋白质、核酸等多种生物靶标。由于链霉亲和素对生物素具有极强的亲和力,且这种结合不受pH值及温度范围变化的影响,因此成为免疫荧光显微镜、流式细胞术、蛋白质印迹等生物检测应用的理想选择。AAT Bioquest®提供多种经典荧光染料标记的链霉亲和素偶联物(如FITC、TRITC、Texas Red®、Cy3®、Cy5®和Cy7®),以及我们独创的水溶性、光稳定性优异的iFluor®和mFluor™染料。
然而,传统生物素-亲和素检测系统仍受限于现有荧光偶联物的信号强度不足。Streptavidin Xtra™ iFluor偶联物作为新一代高亮度链霉亲和素偶联物,其激发与发射特性与Alexa Fluor荧光团几乎一致,同时信号强度提升3~5倍。该系列产品是检测细胞成像或流式细胞术中低丰度靶标的强大工具。
适用仪器
流式细胞仪 | |
Ex: | 488 nm |
Em: | 530/30 nm |
通道: | FITC 通道 |
荧光显微镜 | |
Ex: | FITC滤波片组 |
Em: | FITC 滤波片组 |
推荐孔板: | 黑色透明底板 |
样品实验方案
溶液配制
1.储备溶液配制
所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
链霉亲和素-Xtra 储备溶液(1 mg / mL):加入100 uL的Cat#46000和1 mL的Cat#46001的ddH2O,制成1mg/mL的储备溶液。
注意:此重组溶液在4°C储存并避光保存后,可稳定保存6个月而无明显变化。为了更长的存储时间,可以将重构的溶液分成单次使用的等分试样,或者不分装添加等体积的甘油(浓度为50%),然后将溶液存储在-20°C(避光)。
2.工作溶液配制
链霉亲和素-Xtra 工作溶液:对于IF,建议的染色浓度为1-5 ug / ml。对于FACS,建议在染色浓度为0.1-0.5 ug / 100 uL /百万细胞。
注意: PBS + 0.1%BSA可用作染色缓冲液。
注意:为了获得每种应用的性能,需要仔细确定该试剂的浓度。
注意: 建议的工作稀释度仅供参考,建议用户在测试中使用适当的阳性和阴性对照对产品进行滴定。
样品示例及操作
- 按照说明书中的建议用目标抗体封闭和处理样品。
- 在样品中以适当的浓度和持续时间添加生物素偶联的二抗工作溶液。注意:请验证您的生物素偶联抗体与实验中使用的一抗的相容性和类型。例如,如果一抗是小鼠抗体,则与生物素结合的山羊抗小鼠抗体可用于该测定。
- 在室温下用链霉亲和素-Xtra 工作溶液孵育细胞30分钟至1小时。 注意: 孵育的时间需要仔细确定。
- 取出工作溶液,然后将细胞重悬在缓冲液中。
- 使用荧光显微镜拍摄图像或使用流式细胞仪记录强度。