pH荧光探针Protonex 红600-乳胶微珠偶联物

Protonex 红600-Latex Bead 偶联物是美国AAT Bioquest生产的pH荧光探针，Protonex Red染料显示出pH依赖性荧光。与大多数在较高pH下荧光更强的荧光染料不同，酸性条件可增强Protonex Red染料的荧光。随着pH从中性降低到酸性，Protonex Red染料的荧光急剧增加。细胞外缺乏荧光洗涤步骤。Protonex Red染料为监测酸性细胞区室（如内体和溶酶体）提供了强大的工具。Protonex Red染料在细胞外是非荧光的，但在酸性区室（如吞噬体，溶酶体和内体）中发出明亮的红色荧光。这种Protonex Red可以对细胞酸性隔室进行特异性检测，降低信号可变性，提高成像或流量应用的准确度。它还可以用于多重细胞功能分析与绿色染料，如GFP，Fluo-8，钙黄绿素或FITC标记的抗体。Protonex Red具有与德克萨斯红相似的光谱特性，使得普通的德克萨斯红过滤器可用于Protonex Red的分析。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Protonex 红600-Latex Bead 偶联物。 

点击查看光谱

操作步骤

1.根据需要准备细胞。例如，以10 ⁷细胞/ mL Hanks和20 mM Hepes缓冲液（HHBS）制备粒细胞，向聚丙烯管中加入100μL。

注意：应单独评估每个细胞系，以确定佳细胞密度。

2.向试管中加入1-10μL的Protonex Red 600-Latex珠缀合物，并在37°C轻轻摇动孵育30分钟。

注意：应单独评估每个细胞系，以确定佳孵育时间。

3.准备一个相同的样品，在4°C下孵育作为对照。

4.孵育30分钟结束时，通过加入2mL冰冷的HHBS终止吞噬作用。混合，然后用冷HBSS洗涤细胞2次。

5.将细胞重悬于500μL的冷HBSS中，将样品保持在4℃，并尽快在Ex / Em 570/600 nM（TexasRed®过滤器组）中进行分析。

参考文献

PHD2 is a regulator for glycolytic reprogramming in macrophages
Authors: Annemarie Guentsch, Angelika Beneke, Lija Swain, Katja Farhat, Shunmugam Nagarajan, Ben Wielockx, Kaamini Raithatha, Jan Dudek, Peter Rehling, Anke Zieseniss
Journal: Molecular and Cellular Biology (2016): MCB--00236