钙离子荧光探针OregonGreen488 BAPTA1，AM
| Ex (nm) | 493 | Em (nm) | 522 |
| 分子量 | 1258.07 | 溶剂 | DMSO |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
产品货期
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产品介绍
OG488 BAPTA-1 AM 与 Oregon Green® 488 BAPTA-1 AM 酯为同一分子。这是一种细胞可渗透且可由可见光激发的钙离子指示剂，常与FITC滤光片组配套使用。通过将溶解后的指示剂直接加入培养细胞的培养皿中，即可完成对细胞的OG488 BAPTA-1 AM负载。这些细胞的荧光信号通常通过荧光显微镜、荧光微孔板检测或流式细胞术进行测量。
适用仪器
| 荧光显微镜 | |
| Ex: | FITC 滤波片组 |
| Em： | FITC 滤波片组 |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
| 流式细胞仪 | |
| Ex: | 488 |
| Em： | 530/30nm |
| 通道: | FITC |
| 荧光酶标仪 | |
| Ex: | 490 nm |
| Em： | 525 nm |
| Cutoff： | 515 nm |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
| 读取模式: | 底读模式/可分液处理 |
溶解方案(溶剂以说明书为准)
| 0.1 mg | 0.5 mg | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 79.487 µL | 397.434 µL | 794.868 µL | 3.974 mL | 7.949 mL |
| 5 mM | 15.897 µL | 79.487 µL | 158.974 µL | 794.868 µL | 1.59 mL |
| 10 mM | 7.949 µL | 39.743 µL | 79.487 µL | 397.434 µL | 794.868 µL |
样品实验方案
储备溶液配制:
除非另有说明，所有未使用的储备溶液应分成一次性等份，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融。
OG488 BAPTA-1 AM
在高质量无水 DMSO 中制备 2 至 5 mM OG488 BAPTA-1 AM 储备溶液。
工作溶液配制:
OG488 BAPTA-1 AM 工作溶液
1.实验当天，将 OG488 BAPTA-1 AM 溶解在 DMSO 中，或将等份指示剂储备溶液解冻至室温。
2.在您选择的缓冲液（例如 Hanks 和 Hepes 缓冲液）中用 0.04% Pluronic® F-127 制备 2 至 20 µM OG488 BAPTA-1 AM 工作溶液。对于大多数细胞系，建议终浓度为 4-5 μM 的 Cal Green 1 AM。细胞加载所需染料的准确浓度必须根据经验确定。
注意：非离子洗涤剂 Pluronic® F-127 有时用于增加 Cal Green™ 1 AM 的水溶性。可以从百萤购买各种 Pluronic® F-127
注意：如果您的细胞含有有机阴离子转运蛋白，可将丙磺舒 (1-2 mM) 添加到染料工作溶液中（孔中的最终浓度为 0.5-1 mM），以减少脱酯后染料的外漏。各种 ReadiUse 丙磺舒产品，包括水溶性、钠盐和稳定溶液，均可从百萤购买。
操作步骤
以下是我们推荐的将 AM 酯加载到活细胞中的方案。该方案仅提供指导，实际应根据您的具体需求进行修改。
1.在生长培养基中将细胞孵育过夜。
2.第二天，将 1X OG488 BAPTA-1 AM 工作溶液添加到您的细胞培养板中。
3.将载有染料的板在细胞培养箱中于 37°C 下孵育 30 至 60 分钟。
注意：孵育染料超过 1 小时可以提高某些细胞系的信号强度。
4.用 HHBS 或您选择的缓冲液（包含阴离子转运蛋白抑制剂，例如 1 mM 丙磺舒，如果适用）替换染料工作溶液，以去除任何多余的探针。
5.根据需要添加刺激剂，同时使用配备 FITC 滤光片组的荧光显微镜或包含可编程液体处理系统（例如 FDSS、FLIPR 或 FlexStation）的荧光酶标仪在 Ex/Em = 490/525 nm 处测量荧光。
