核黄(Hoechst S769121)神经元示踪染料 CAS 74681-68-8
Ex (nm) | 372 | Em (nm) | 504 |
分子量 | 596.96 | 溶剂 | DMSO |
存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
产品基本信息
产品名称:核黄 [Hoechst S769121]神经元示踪染料
CAS:74681-68-8
储存条件:-20℃干燥
保质期:24个月
产品物理化学光谱特性
分子量:651.01
外观:亮黄色粉末
溶剂:水或DMSO
激发波长(nm):355
发射波长(nm):495
产品介绍
Hoechst染料是一系列荧光染料,用于标记荧光显微镜和流式细胞仪中使用的DNA。因为这些荧光染色标记DNA,它们也常用于可视化细胞核和线粒体。通常使用这些密切相关的双苯并酰亚胺中的两种,Hoechst 33258和Hoechst 33342。两种染料都被约350nm的紫外光激发,并且都发射蓝/青色荧光,发射大值为461nm。 Hoechst染色剂可以与活细胞或固定细胞一起使用,并且通常用作另一种核酸染色剂DAPI的替代物。它们之间的关键区别在于Hoechst 33342的额外乙基使其更具亲脂性,因此更容易穿过完整的细胞膜。在某些应用中,Hoechst 33258的渗透性明显低于Hoechst 33342.这些染料也可用于通过绘制标准的发射 - 含量曲线来检测样品DNA的含量。
长波示踪剂核黄通常与流行的逆行示踪剂True Blue结合用于双色神经元映射。在神经元细胞中,核黄色主要用黄色荧光染色细胞核,而真正的蓝色是紫外光可激发的二价阳离子染料,用蓝色荧光染色细胞质。当进行免疫组织化学处理时,核黄色和真蓝色都是稳定的,并且可以用于将DAB光转化成不溶的电子致密反应产物。 Hoechst 33258,Hoechst 33342和Nuclear Yellow,当通过轴突逆行运输到它们的亲本细胞体时,可以迁移出轴突和细胞体,如相邻神经胶质细胞核的荧光所示。发现这种迁移在切片在水中储存期间在体内和体外都发生。当使用1%浓度的示踪剂时,可以通过限制存活时间来控制体内迁移。可以通过材料的快速组织学处理来防止体外迁移。
染色细胞分析方案
以下程序适用于大多数细胞类型。 生长培养基,细胞密度,其他细胞类型的存在和其他因素可能影响染色。 玻璃器皿上的残留洗涤剂也可能影响许多生物的染色,导致在有或没有细胞存在的溶液中出现明亮染色的物质。
1)通过离心沉淀细胞
2)将细胞重悬于缓冲溶液或培养基中,在pH7.4下具有佳染料结合。
3)在盖玻片或细胞培养孔中原位染色贴壁细胞。
4)使用0.5和5uM之间的浓度添加Hoechst染色剂。
5)孵育细胞15至60分钟。
注意:孵育时间和染料浓度需要通过实验测试。在初的实验中,好在整个建议范围内尝试几种染料浓度,以确定产生佳染色的浓度。
参考文献
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