MycoLight 快速荧光细菌革兰染色试剂盒

MycoLight 快速荧光细菌革兰染色试剂盒是美国AAT Bioquest生产的染色细菌的试剂盒，MycoLight 快速荧光细菌革兰氏染色试剂盒为测定活细菌的革兰氏特性提供了一种简便的方法。革兰氏染色是临床和研究中常用的方法，用于将细菌种类在分类学上分为两大类。不幸的是，传统的革兰氏染色方法繁琐，且涉及细菌固定步骤，如果要对细菌进行进一步表征，这可能是一个重大缺点。MycoLight 快速荧光细菌革兰氏染色试剂盒为活细菌提供了一步法革兰氏染色检测，克服了传统革兰氏染色检测固有的问题。MycoLight 快速荧光细菌革兰氏染色试剂盒使用两种 DNA 染料，MycoLight Green 和 MycoLight Red，它们对革兰氏阳性和阴性细菌具有不同的染色能力。MycoLight Green 可对革兰氏阳性和阴性细菌进行染色，而 MycoLight Red 优先标记革兰氏阳性细菌。这两种染料的最大激发/发射波长分别约为：MycoLight Green 为 484/504 nm，MycoLight Red 为 650/669 nm。因此，当用这些染料对革兰氏阳性和阴性细菌的混合物进行染色时，革兰氏阳性细菌将发出红色荧光，革兰氏阴性细菌将发出绿色荧光。革兰氏阳性和阴性染色可分别使用 Cy5 和 FITC 滤光片组通过荧光计进行监测。 百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的MycoLight 快速荧光细菌革兰染色试剂盒。 

样品实验方案

简要概述

1.准备细菌样本
2.准备并将MycoLight 染料工作溶液添加到细菌样品中
3.在室温下与MycoLight 染料工作溶液在黑暗中孵育15分钟
4.使用FITC和Cy5滤光片组通过荧光显微镜或荧光光谱分析样品

 

溶液制备

1.工作溶液配制

1.1MycoLight 染料工作溶液：
在试管中混合等体积的MycoLight 绿色（组分A）和MycoLight 红色（组分B），并充分混合。

 

样品示例及操作

1.细菌样品的制备

1.1准备浓度约为10⁷cells / ml的细菌样品。 在适当的培养基中使细菌生长到对数后期。 注意：在波长= 600 nm（OD600）处测量细菌培养物的光密度，以确定细胞数。 对于大肠杆菌培养，OD600 = 1.0等于8 x 10⁸细胞/ ml。

1.2通过以10,000 x g离心10分钟除去培养基，然后将沉淀重新悬浮在ddH₂O中，将细菌浓度调节至〜10⁷细胞/ ml。

 

2.染色方案

2.1向100 µL细菌悬液中加入2 µL MycoLight 染料工作溶液。

2.2充分混合并在室温下于黑暗中孵育15分钟。

2.3用荧光显微镜通过FITC（Ex / Em = 488/530 nm）通道监测革兰氏阴性细菌的荧光，并通过Cy5（Ex / Em =650/669nm）通道监测革兰氏阳性细菌的荧光。 注意：该试剂盒仅提供指导，应根据不同的细菌菌株或其他特定需求进行优化。 注意：该试剂盒中的革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的相对比例也可以通过荧光光谱法估算。

 

参考文献

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