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Live or Dead 可固定死细胞标记试剂盒 绿色荧光

英文名称:Live or Dead™ Fixable Dead Cell Staining Kit *Green Fluorescence with 405 nm Excitation*
产品参数
Ex (nm)412Em (nm)505
分子量-溶剂-
存储条件-
产品概述

我们的Live或Dead 可固定死细胞染色试剂盒是用于标记细胞的一组工具,用于细胞功能的荧光显微镜研究。 细胞的有效标记为研究时空背景下的细胞事件提供了一种有力的方法。 这种特殊的试剂盒设计用于在绿色荧光中均匀标记固定的哺乳动物细胞,以便通过紫激光激发在流式细胞仪中使用。 该试剂盒使用专有的绿色荧光染料,该染料在与细胞成分结合后会发出更多的荧光。 试剂盒中使用的荧光染料已被紫激光(405 nm激发)充分激发到510 nm的荧光。 该试剂盒为所有基本组件提供了优化的细胞标记方案。 它是保存特定细胞荧光图像的工具,也可用于荧光流式细胞仪应用。

适用仪器


流式细胞仪  
Ex: 405 nm 
Em: 525/40 nm 
通道: AmCyan 通道

 


荧光显微镜

Ex: 408 nm
Em: 512 nm
推荐孔板: 黑色透明底板
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.在HHBS中制备样品(0.5 mL /测定)
2.替换为HHBS
3.将Stain It V510添加到细胞悬液中
4.在室温或37°C下将细胞染色20-60分钟
5.清洗细胞
6.修复细胞(可选)
7.使用适当的激发/发射滤光片,用流式细胞仪和/或荧光显微镜检查样品

 

溶液配制

1.储备溶液配制

1.1 Stain It V510储备溶液(500X):
将200 µL DMSO(组分B)添加到Stain It V510(组分A)的小瓶中,以得到500X Stain It V510储备液。

点击查看细胞制备方案

 

样品示例及操作

1.使用1X Hanks和20 mM Hepes缓冲液(HHBS)或您选择的无叠氮化钠和无血清/蛋白质的缓冲液制备细胞。

2.用HHBS或您选择的无叠氮化物和无血清/蛋白质的缓冲液洗涤细胞一次。

3.以5-10×106 / mL的浓度在HHBS或您选择的无叠氮化物和无血清/蛋白质的缓冲液中重悬细胞。

4.将1 µL 500X Stain It Violet 510储备溶液添加到0.5 mL细胞/测定中,并充分混合。

5.在室温或37°C,5%CO2的培养箱中避光保存20-60分钟。 注意:应根据不同细胞系实验确的染色浓度和孵育时间。

6.洗涤细胞两次,然后用HHBS或您选择的缓冲液重悬细胞。

7.根据需要固定细胞(可选)。

8.使用适当的激发/发射滤光片,使用流式细胞仪和/或荧光显微镜分析细胞。

 

参考文献

Autophagy proteins are not universally required for phagosome maturation
Authors: Marija Cemma, Sergio Grinstein, John H Brumell
Journal: Autophagy (2016): 1440--1446

Differential detection of tumor cells using a combination of cell rolling, multivalent binding, and multiple antibodies
Authors: Ja Hye Myung, Khyati A Gajjar, Jihua Chen, Robert E Molokie, Seungpyo Hong
Journal: Analytical chemistry (2014): 6088--6094

Versatile fabrication of nanoscale sol--gel bioactive glass particles for efficient bone tissue regeneration
Authors: Bo Lei, Xiaofeng Chen, Xue Han, Jiaan Zhou
Journal: Journal of Materials Chemistry (2012): 16906--16913

Advanced glycation end-products increase IL-6 and ICAM-1 expression via RAGE, MAPK and NF-$\kappa$B pathways in human gingival fibroblasts
Authors: K Nonaka, Y Kajiura, M Bando, E Sakamoto, Y Inagaki, JH Lew, K Naruishi, T Ikuta, K Yoshida, T Kobayashi
Journal: Journal of Periodontal Research

 

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