iFluor 532小麦胚芽凝集素（WGA）探针
| Ex (nm) | 537 | Em (nm) | 560 |
| 分子量 | N/A | 溶剂 | Water |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
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产品货期： 咨询 |
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适用范围： 该产品用于标记细胞膜（如：活细胞、固定细胞、组织切片、酵母、革兰氏阳性细菌及真菌等 ），从而进行荧光成像和分析。也可用于免疫荧光（IF）、免疫组织化学（IHC）和流式细胞术（FC）。 |
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产品优势： 1.应用广泛； 2.不受膜电位控制； 3.用于细胞膜表面的标记，有助于膜结构的成像； |
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产品简介： AAT Bioquest 生产的小麦胚芽凝集素（WGA）能与N-乙酰葡萄糖胺和唾液酸结合，是目前研究最多且最有用的凝集素之一。 |
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注意事项： 该产品不适用于革兰氏阴性细菌。 |
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| 查看光谱 | |
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适用仪器： |
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| 荧光显微镜 | |
| Ex: | Cy3/TRITC 滤波片组 |
| Em： | Cy3/TRITC 滤波片组 |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
样品分析方案
溶液配制
储备溶液配制
iFluor 532 小麦胚芽凝集素 (WGA) 缀合物储备液 (200X)
将 500 µL ddH2O 添加到粉末小瓶中，制成 2 mg/mL 的储备溶液。
注意：重新配制的缀合物溶液可在 2-8 °C 下短期储存，或在 -20 °C 下长期储存。
工作溶液配制
iFluor 532小麦胚芽凝集素 (WGA) 缀合物工作溶液 (1X)
将 5 μL 200X WGA 储备溶液添加到 1 mL HHBS 缓冲液中。
注意：不同细胞系的优化染色浓度可能不同。 活细胞的推荐起始浓度为 5-10 µg/mL。
操作方案
活细胞染色
1. 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。
2. 添加 100 µL iFluor 532-WGA 工作溶液。
3. 将细胞与 WGA 工作溶液在 37°C 下孵育 10-30 分钟。
4. 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。
5. 使用 Cy3/TRITC 滤波片组在荧光显微镜上成像细胞。
固定细胞染色
1. 用含4%甲醛的PBS溶液固定细胞。
注意：对于固定细胞膜染色，建议在没有透化步骤的情况下进行染色。固定后透化步骤会导致细胞内区室染色，如高尔基体和内质网 (ER) 结构染色。
2. 添加 100 µL iFluor 532-WGA 工作溶液。
3. 在室温下，用 WGA 工作溶液孵育细胞 10-30 分钟。
4. 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。
5. 使用 Cy3/TRITC 滤波片组在荧光显微镜上成像细胞。
图示
图 1. 使用 10 µg/mL 的 iFluor® 532-小麦胚芽凝集素 (WGA) 结合物对活的和固定的 HeLa 细胞进行染色 30 分钟。使用 Cy3/TRITC 滤光片组在荧光显微镜上获取图像。
