链霉亲和素偶联物 iFluor 405-标记
Ex (nm) | 403 | Em (nm) | 427 |
分子量 | ~52000 | 溶剂 | Water |
存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
产品货期
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产品优势
1.灵活性强:同一生物素化抗体可搭配不同标记的链霉亲和素(荧光、酶、纳米颗粒)
2.特异性高:生物素-链霉亲和素结合几乎不可逆,背景低。
3.稳定性好:极端物理化学条件下(80°C、SDS、极端pH)稳定性好
3.适用性广:兼容流式、免疫荧光、ELISA、原位杂交等多种技术
适用范围
用于蛋白质、蛋白质基序、核酸及其他分子的特异性检测
注意事项
链霉亲和素染料有液体和固体两种形式,该产品以固体形式提供,请在<-15℃冰箱避光保存。
产品介绍
AAT Bioquest品牌的iFluor®荧光染料系列是专为蛋白质(尤其是抗体)标记而优化的荧光标记系统。这些染料具有高亮度、优异的光稳定性,且对蛋白活性影响极小,可被主流荧光仪器的激光线(如350nm、405nm、488nm、555nm和633nm)有效激发。
iFluor®405-链霉亲和素偶联物由链霉亲和素(作为生物素结合蛋白)与共价连接的iFluor®405(作为荧光标记)组成。其荧光激发峰和发射峰分别位于~401nm和~420nm。这一光谱特性使其成为Alexa Fluor®405-链霉亲和素偶联物(Alexa Fluor®是Invitrogen的注册商标)的替代品。作为间接免疫荧光染色的第二步检测试剂,与生物素化一抗配合使用,是检测生物素-链霉亲和素体系的重要工具。
样品实验方案
(如无特殊说明,所有未使用的储备液均应分装为单次使用量,配制后保存于-20°C,避免反复冻融。)
溶液配制
储备溶液配制
iFluor®405-链霉亲和素储备溶液(1 mg / mL):
将含有0.1%BSA的ddH2O加入iFluor®405-链霉亲和素小瓶中,得到1mg / mL储备液
注意事项
复溶后储备液,短期保存:4℃避光;如需长时间保存,加入等体积甘油(终浓度50%),-20℃避光保存;
工作溶液配制
iFluor®405-链霉亲和素工作溶液:
1.推荐染色浓度
免疫荧光 (IF):1-5 ug / ml
流式细胞术(FACS):0.1-0.5 ug / 100 uL /百万细胞
2.染色缓冲液
推荐使用PBS + 0.1%BSA
3.注意事项
不同应用(IF、FACS等)需通过预实验确定最合适浓度;
建议的工作稀释度仅供参考,用户应在实验中使用适当的阳性对照和阴性对照对产品进行滴定,优化试剂的工作浓度。
样品示例及操作
1.按照说明书的方案,使用目标抗体对样本进行封闭和处理;
2.在样本中加入适当浓度的生物素偶联二抗工作液,孵育指定时间;
注意:请确认所用生物素偶联二抗与一抗的兼容性和匹配类型;(如:一抗是小鼠抗体,则用偶联生物素的山羊抗小鼠二抗}
3.在室温下用iFluor®405-链霉亲和素工作溶液孵育细胞30分钟至1小时。
注意: 孵育的时间需要仔细确定。
4.取出工作溶液后,将细胞重新悬浮在缓冲液中。
5.使用荧光显微镜拍照或使用流式细胞仪检测荧光强度。