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链霉亲和素偶联物 iFluor 405-标记

英文名称:iFluor® 405-streptavidin conjugate
产品参数
Ex (nm)403Em (nm)427
分子量~52000溶剂Water
存储条件在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品货期

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产品优势  

1.灵活性强:同一生物素化抗体可搭配不同标记的链霉亲和素(荧光、酶、纳米颗粒)

2.特异性高:生物素-链霉亲和素结合几乎不可逆,背景低。 

3.稳定性好:极端物理化学条件下(80°C、SDS、极端pH)稳定性好

3.适用性广:兼容流式、免疫荧光、ELISA、原位杂交等多种技术

 

适用范围

用于蛋白质、蛋白质基序、核酸及其他分子的特异性检测

 

注意事项

链霉亲和素染料有液体和固体两种形式,该产品以固体形式提供,请在<-15℃冰箱避光保存。

 

产品介绍

AAT Bioquest品牌的iFluor®荧光染料系列是专为蛋白质(尤其是抗体)标记而优化的荧光标记系统。这些染料具有高亮度、优异的光稳定性,且对蛋白活性影响极小,可被主流荧光仪器的激光线(如350nm、405nm、488nm、555nm和633nm)有效激发。

iFluor®405-链霉亲和素偶联物由链霉亲和素(作为生物素结合蛋白)与共价连接的iFluor®405(作为荧光标记)组成。其荧光激发峰和发射峰分别位于~401nm和~420nm。这一光谱特性使其成为Alexa Fluor®405-链霉亲和素偶联物(Alexa Fluor®是Invitrogen的注册商标)的替代品。作为间接免疫荧光染色的第二步检测试剂,与生物素化一抗配合使用,是检测生物素-链霉亲和素体系的重要工具。

实验方案

样品实验方案 

如无特殊说明,所有未使用的储备液均应分装为单次使用量,配制后保存于-20°C,避免反复冻融。

溶液配制

储备溶液配制 

iFluor®405-链霉亲和素储备溶液(1 mg / mL):

将含有0.1%BSA的ddH2O加入iFluor®405-链霉亲和素小瓶中,得到1mg / mL储备液

注意事项

复溶后储备液,短期保存:4℃避光;如需长时间保存,加入等体积甘油(终浓度50%),-20℃避光保存;

 

工作溶液配制 

iFluor®405-链霉亲和素工作溶液:

1.推荐染色浓度

免疫荧光 (IF):1-5 ug / ml

流式细胞术(FACS):0.1-0.5 ug / 100 uL /百万细胞

2.染色缓冲液

推荐使用PBS + 0.1%BSA

3.注意事项

不同应用(IF、FACS等)需通过预实验确定最合适浓度;

建议的工作稀释度仅供参考,用户应在实验中使用适当的阳性对照阴性对照对产品进行滴定,优化试剂的工作浓度。

 

样品示例及操作

1.按照说明书的方案,使用目标抗体对样本进行封闭和处理;

2.在样本中加入适当浓度的生物素偶联二抗工作液,孵育指定时间;

注意:请确认所用生物素偶联二抗与一抗的兼容性和匹配类型;(如:一抗是小鼠抗体,则用偶联生物素的山羊抗小鼠二抗}

3.在室温下用iFluor®405-链霉亲和素工作溶液孵育细胞30分钟至1小时。

 注意:  孵育的时间需要仔细确定。

4.取出工作溶液后,将细胞重新悬浮在缓冲液中。

5.使用荧光显微镜拍照或使用流式细胞仪检测荧光强度。