一氧化氮NO荧光探针DAX-J2 IR

DAX-J2 IR 是 AAT Bioquest 最近开发的新型一氧化氮 (NO) 探针。它是一种水溶性荧光试剂，可以在生理条件下测量体内游离NO和一氧化氮合酶（NOS）的活性。 NO 氧化后，DAX-J2 试剂上的保护基团被释放，生成高荧光产物。使用 Cy7® 和 ICG 的滤光片组可以检测 DAX-J2 荧光产物。与流行的 DAF-2 NO 探针相比，DAX-J2 IR 在 NO 检测方面具有明显的优势：1)。 NO 检测不需要酯酶活性。 DAF-2 需要细胞内酯酶裂解其乙酸基团以检测 NO 活性。这种酯酶依赖性常常使 NO 检测变得复杂，因为酯酶活性受到细胞健康和许多其他因素的影响。 2）。 DAX-2 产品表现出与 pH 无关的荧光，而 DAF-2 的荧光受 pH 影响很大。 3）。它对 NO 的检测比 DAF-2 更灵敏。 4).它可用于 NO 的体内成像。

点击查看光谱 

样品操作及实验分析

1）在DMSO中准备5至10 mM DAX-J2 储备溶液。 通过用20 mM Hepes缓冲液（HHBS）将DMSO储备溶液稀释到Hanks溶液中，制成1至10 µM的工作溶液。

2）根据需要处理细胞。

3）在37℃下，将细胞与1-10 µM（来自步骤1），DAX-J2 橙色（目录号16300），红色（目录号16301）或比率580/460（目录号16310）孵育20 -60分钟。

4）用HHBS缓冲液代替染料加载溶液。

5）使用底部读取模式的适当荧光仪器分析细胞。

参考文献

Nitric oxide upregulates microglia phagocytosis and increases transient receptor potential vanilloid type 2 channel expression on the plasma membrane
Authors: Matthew JE Maksoud, Vasiliki Tellios, Dong An, Yun-Yan Xiang, Wei-Yang Lu
Journal: Glia (2019)

Fluorescent real-time quantitative measurements of intracellular peroxynitrite generation and inhibition
Authors: Zhen Luo, Qin Zhao, Jixiang Liu, Jinfang Liao, Ruogu Peng, Yunting Xi, Zhenjun Diwu
Journal: Analytical biochemistry (2017): 44--48

Inducible Nitric Oxide Synthase (iNOS) Is a Novel Negative Regulator of Hematopoietic Stem/Progenitor Cell Trafficking
Authors: Mateusz Adamiak, Ahmed Abdelbaset-Ismail, Joseph B Moore, J Zhao, Ahmed Abdel-Latif, Marcin Wysoczynski, Mariusz Z Ratajczak
Journal: Stem Cell Reviews and Reports (2016): 1--12