Cyber Safe凝胶电泳染料

Cyber Safe DNA 凝胶电泳染料 是一种用于观测DNA琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶新一代染料，其使用特殊的合成工艺，与传统的溴乙锭(EB) 染料相比具有更高的灵敏度，且几乎没有致突变性，是最新的EB替代染。Cyber Safe凝胶电泳染料与DNA结合后，可使用紫外-可见分光光度计或激光光源的设备观测。此染料也可用于RNA 凝胶染色。Cyber Safe DNA凝胶电泳染料在280nm 和502nm有最大激发波长，与DNA结合后的最大发射波长是530nm。

实验方案

1.电泳后染色

1.1按常规方法制备琼脂糖凝胶，胶中不能含任何其他染料。

1.2把保存于DMSO中的10000X  Cyber Safe DNA凝胶电泳染料用TAE或TBE 缓冲液按1:10000稀释成1X Cyber Safe DNA 凝胶电泳染料（比如把10 μL Cyber Safe 用 TAE or TBE 缓冲液稀释到100mL).

1.3染色: 用塑料容器装适量 1X Cyber Safe 染色液，染色液淹没凝胶即可。一般情况下，50mL染色液足以满足常规的小块凝胶，对于较大的凝胶，适量增加染色液用量，确保整块凝胶浸入液面下.

注意：染色容器不要使用玻璃器皿，因为染料会吸附在玻璃器皿的内壁，影响色效果。

1.4浸泡的凝胶室温下放置30分钟 (染色时间因凝胶浓度和厚度而定)，用铝箔盖住容器或置于暗室避光，轻微摇动染色容器（50rpm），不需脱色处理。

1.5在254 nm紫外照射透视下，与双链DNA结合的Cyber Safe呈现绿色荧光。拍照时最好使用绿色滤光片。也可使用300 nm紫外照射透视仪或蓝光透照仪观察。

2.电泳中染色 (仅适于琼脂糖凝胶电泳)

2.1直接用1X Cyber Safe DNA凝胶电泳染料(见1.2）与适量琼脂糖粉末配制凝胶。例如, 要配制25ml熔融的琼脂糖凝胶，可直接在 25ml 1X Cyber Safe中加入适量琼脂糖粉末，摇匀加热。

注意：预制含 Cyber Safe 的凝胶，与配制EB凝胶一样需微波炉加热，结合了Cyber Safe的DNA片段电泳时会比未结合染料的DNA片段走的稍慢，这也与EB染料的情况一样。

2.2电泳: 按常规操作, 电泳后不需要染色或脱色.

2.3在254 nm紫外照射透视下，与双链DNA接合的Cyber Safe呈现绿色荧光。拍照时最好使用绿色滤光片。也可使用300 nm紫外照射透视仪观察。