Cy5 酪胺（Cy5 tyramide）
| Ex (nm) | 651 | Em (nm) | 670 |
| 分子量 | 890.00 | 溶剂 | DMSO |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
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产品货期： 现货 |
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适用范围： 该产品适合标记抗体或蛋白。应用于细胞或组织。 |
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产品优势： 1.荧光信号更强； 2.灵敏度更高； |
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产品简介： Cy5酪胺（Cy5 tyramide），是一种用于荧光信号放大的产品，它通过HRP和过氧化氢催化，标记到抗体上。 |
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注意事项： 该产品不能进行活体成像。 |
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| 查看光谱 | |
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适用仪器： |
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| 荧光显微镜 | |
| Ex: | Cy5滤波片组 |
| Em： | Cy5滤波片组 |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
| 滤波片： | Cy5滤波片组 |
样品染色示例
概述
1.固定/透化/阻断细胞或组织
2.在封闭缓冲液中加入一抗
3.加入HRP标记的二抗
4.准备酪胺工作溶液，室温下将其用于细胞或组织中5-10分钟
溶液配置
储备溶液配置
在没有额外说明的情况下，所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融
制备储存溶液（1000x）
工作溶液配置
酪胺工作溶液（1X）
将1μLTyramide原液加入1 mL含有0.003％H2O2的缓冲液中。
注意：1.Tris Buffer，pH = 7.4更合适。
2. Tyramide工作溶液即用即配。
实验方案
（本方案适用于细胞核组织染色）
1.在室温下，用3.7％甲醛或低聚甲醛的PBS固定细胞或组织20分钟。
2.用PBS冲洗细胞或组织两次。
3.在室温下，用0.1％Triton X-100溶液使细胞透化1-5分钟。
4.用PBS冲洗细胞或组织两次。
注意：组织固定，脱蜡和再水化，根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水。根据需要，使用优选的特定溶液/方案进行抗原修复。过氧化物酶标记
1.可选：将细胞或组织样本置于过氧化物酶淬灭液（如3%过氧化氢）中孵育10分钟，以淬灭内源性过氧化物酶活性，然后在室温下，用PBS冲洗两次。
2.可选：如果使用HRP偶联的链霉抗生物素蛋白，建议通过生物素阻断缓冲液阻断内源性生物素。
3.用封闭溶液（如含有1％BSA的PBS）在4℃下封闭30分钟。
4.取出封闭溶液，加入稀释好的一抗，在室温下孵育60分钟或在4°C下孵育过夜。
5.用PBS洗涤三次，每次5分钟。
6.向每个样品中加入100μL二抗-HRP工作溶液，在室温下孵育60分钟。
注意：孵育时间和浓度可根据信号强度而调整。
7.用PBS洗涤三次，每次5分钟。
酪胺标记
1.准备100μL 酪胺工作溶液，将其应用于每个样品，并在室温下孵育5-10分钟。
注意：如果您观察到非特异性信号，可以缩短酪胺的孵育时间。 您应使用不同孵育时间点的阳性和阴性对照样本，以优化孵育期。 或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的酪胺。
2.用PBS冲洗三次
复染和荧光成像
1.根据需要，对细胞或组织样本复染。 AAT提供了一系列细胞核复染试剂，如表1所列。按照试剂说明书进行操作。
2.加上盖玻片。
3.使用适当的滤波器观察酪胺标记的信号。
表1.推荐用于核复染的产品
| 货号 | 产品名称 | Ex/Em(nm) |
| 17548 | Nuclear Blue DCS1 | 350/461 |
| 17550 | Nuclear Green DCS1 | 503/526 |
| 17551 | Nuclear Orange DCS1 | 528/576 |
| 17552 | Nuclear Red DCS1 | 642/660 |
参考文献
Authors: Li, Han and Yang, Zhen and Liang, Wukaiyang and Nie, Hao and Guan, Yuqi and Yang, Ni and Ji, Tianyi and Liu, Yu and Huang, Yi and Zhang, Le and others,
Journal: The Journals of Gerontology, Series A: Biological Sciences and Medical Sciences (2024): glae059
Authors: Tang, Yang and Wei, Jingsun and Ge, Xiaoxu and Yu, Chengxuan and Lu, Wei and Qian, Yucheng and Yang, Hang and Fu, Dongliang and Fang, Yimin and Zhou, Yinyi and others,
Journal: Cancer Letters (2024): 216798
