Cell Meter 核细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光
Ex (nm) | 503 | Em (nm) | 527 |
分子量 | - | 溶剂 | - |
存储条件 | - |
我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞生存力的工具。有多种参数可用于检测细胞活力。该特定试剂盒旨在通过测量凋亡染色质浓缩来监测细胞凋亡。与健康细胞相比,凋亡细胞的染色质紧密结合更多数量的核染料。我们的Cell Meter 核细胞凋亡测定试剂盒为所有必需成分提供了优化的测定方法,可用于检测核浓缩细胞的凋亡。这种荧光测定法是基于使用我们专有的非荧光染料对细胞中DNA含量的检测,该染料在与DNA结合后会发出强烈的荧光。在正常细胞中,Nuclear Green 不具有细胞渗透性,但是在凋亡细胞中,质膜受损或细胞代谢受损/没有细胞代谢的细胞无法阻止染料进入细胞。染料一旦进入细胞,便会与细胞内DNA结合,产生高度荧光的复合物,从而将细胞鉴定为无活力的细胞。核绿色染色;可以使用流式细胞仪(FL1通道)或荧光显微镜(FITC滤波片组)测量DCS1。该试剂盒可与我们的其他凋亡试剂一起使用,例如我们的Cell Meter NIR线粒体膜电位检测试剂盒(Cat#22802),用于细胞存活率和凋亡的多参数研究。该试剂盒经过优化,可筛选凋亡抑制剂。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 核细胞凋亡检测试剂盒。
适用仪器
流式细胞仪 | |
Ex: | 488 nm |
Em: | 530/30 nm |
通道: | FITC 通道 |
样品实验方案
简要概述
- 用5×105至1×106cell/ mL的密度制备含测试化合物的细胞
- 将5µL 200X Nuclear Green DCS1加入1 mL细胞溶液中
- 将细胞在37°C,5%CO2培养箱中孵育30至60分钟
- 沉淀细胞并将细胞重悬于1 mL生长培养基中
- 使用带有FL1通道的流式细胞仪分析荧光强度
实验步骤
1.对于每个样品,在1 mL温暖的培养基或您选择的缓冲液中以5×105至1×106细胞/ mL的密度制备细胞。注意:应单独评估每种细胞系,以确定诱导凋亡的细胞密度。
2.用测试化合物处理细胞以诱导凋亡。
3.向处理过的细胞中加入5 µL 200X Nuclear Green DCS1(组分A)。
4.将细胞溶液在37°C,5%CO2培养箱中孵育30至60分钟。注意:对于贴壁细胞,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞贴壁,并在用Nuclear Green DCS1染料上样溶液孵育之前,用含血清的培养基洗涤细胞一次。合适的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。
5.可选:以1000 rpm离心细胞4分钟,然后将细胞重悬于1 mL的测定缓冲液(组分B)或自备缓冲液中。
6.使用带有FL1通道的流式细胞仪(Ex / Em = 490/525 nm)检测荧光强度。
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