Cell Meter 荧光法吞噬检测试剂盒 *红色荧光*

Cell Meter 荧光法吞噬检测试剂盒 红色荧光 是美国AAT Bioquest生产的吞噬检测试剂盒，吞噬作用定义为细胞对质膜内的颗粒的细胞摄取。通过吞噬和破坏入侵的微生物，吞噬作用的过程对先天免疫反应至关重要。通过凋亡小体，维持组织稳态和重塑也需要吞噬作用。吞噬作用的摄取机制取决于颗粒的大小，受体 - 配体相互作用和细胞骨架的参与。一旦内化，吞噬体与溶酶体融合形成用于消化的第二吞噬溶酶体，导致pH逐渐降低。我们的Cell Meter 荧光吞噬测定试剂盒使用独特的pH依赖性Protonex 600红色染料。与大多数现有荧光染料不同，Protonex 600染料在细胞外是非荧光的。然而，当它们在检测酸性区室如内体和溶酶体时，荧光会大幅度增加。这种特性使其易于使用而无需台盼蓝淬灭步骤和用于研究吞噬作用。 Cell Meter 荧光吞噬测定试剂盒还包括绿色荧光细胞活力染料，可通过荧光显微镜同时检测活细胞和吞噬作用过程。该测定还可以适用于荧光酶标仪和流式细胞术检测。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter 荧光法吞噬检测试剂盒。 

操作步骤

1.将Cytochalasin D作为阳性对照或DMSO或您的测试化合物添加到每个孔中。 注意：测定中使用的细胞松弛素D的浓度应针对每个单独的细胞系进行优化。

2.将板在细胞培养箱中孵育30分钟。

3.每孔加入12.5μLProtonex 600 Red-Latex Beads Conjugate溶液（12X）。

4.将板在细胞培养箱中孵育4小时。 注意：每个细胞系的用户应优化孵育时间。

5.每孔加入12.5μLCytoTrace Green工作溶液（12X）。

6.将板在细胞培养箱中孵育30分钟。

7.用1X PBS洗涤板两次。

8.用Texas Red滤波片（Ex / Em = 570 / 600nm）和具有FITC滤波片的CytoTrace Green（Ex / Em = 490 / 525nm）观察细胞内的吞噬作用。

数据分析

图示：使用Cell Meter 荧光吞噬作用测定试剂盒（Cat＃21225）检测RAW 264.7细胞中的吞噬作用。 将RAW 264.7细胞与（B）或不用（A）细胞松弛素D孵育30分钟，然后加入Protonex 600 Red-Latex Beads在生长培养基中并孵育4小时，然后加入Cell Tracker并孵育30分钟。 使用Keyence荧光显微镜拍摄图像。

参考文献

PHD2 is a regulator for glycolytic reprogramming in macrophages
Authors: Annemarie Guentsch, Angelika Beneke, Lija Swain, Katja Farhat, Shunmugam Nagarajan, Ben Wielockx, Kaamini Raithatha, Jan Dudek, Peter Rehling, Anke Zieseniss
Journal: Molecular and Cellular Biology (2016): MCB--00236