Cell Explorer 活细胞标记试剂盒 橙色荧光，在405nm激发

Cell Explorer 活细胞标记试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于标记活细胞的试剂盒，Cell Explorer荧光成像试剂盒是一类细胞标记工具，用于荧光显微法细胞功能的研究。Cell Explorer系列标记试剂盒提供全的细胞及相关细胞器荧光标记方案，包括固定化死细胞标记、活细胞标记、细胞示踪等多种产品，每种检测方案均能提供蓝色/绿色/红色/橙色等不同荧光检测方法。这种细胞标签为从空间上和时间上研究发生的细胞活动提供了一种十分有力的方法。Cell Explorer活细胞标记试剂盒 *橙色荧光，在405nm处激发* 可以使活细胞带上相同的标签，在紫罗兰激光（405nm）激发下，用于流式细胞分析中。本试剂盒使用一种特殊的橙色荧光染料，一旦进入活细胞，其荧光强度增强。这种染料是一种疏水性复合物，它可轻易地渗透进入活细胞。通过细胞内酯酶的水解这种弱荧光底物，形成具有高强度荧光的亲水性产物，并且该产物能够在细胞质中积累。它可以用于流式细胞分析中。本试剂盒使用的荧光染料在405nm处被紫罗兰激光激发，荧光发射高峰在550 nm处。本试剂盒提供所有检测的必需组分和佳的细胞标记方案。它适用于增殖型和非增殖型细胞的标记，也可以用于标记悬浮和贴壁细胞。它在许多研究都非常有用，包括细胞粘附性、趋化性、多药物抗性、细胞活性、细胞凋亡和细胞毒性。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Explorer 活细胞标记试剂盒。 

 

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荧光显微镜
Ex:	405 nm
Em：	545/25  nm
推荐孔板:	黑色透明底板

操作方法

简要概述

1.在生长培养基中制备细胞
2.去除生长培养基
3.添加CytoCalcein Violet 550工作溶液（100μL/孔用于96孔板或25μL/孔用于384孔板）
4.将细胞在37℃下染色30分钟至1小时
5.清洗细胞
6.在带有545/25nm滤波片的荧光显微镜下或带有525/50nm滤波片的流式细胞仪（Pacific Orange通道）下检测样品

 

溶液制备

1.制备储备溶液

        除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. CytoCalcein Violet 550原液：
将20μLDMSO加入到CytoCalcein Violet 550（组分A）的小瓶中并充分混合以制备CytoCalcein Violet 550原液。 避光。 注意：20μL的CytoCalcein Violet 550原液足以容纳1个平板。

2.制备工作溶液

        将20μLCytoCalcein Violet 550原液添加到10 mL HHBS（组分B）中并充分混合，制成CytoCalcein Violet 550工作溶液。有关细胞样品制备的指南，请点击查看

 

样品实验方案

1.去除生长培养基。

2.将100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的CytoCalcein Violet 550工作溶液加入细胞板中。

3.将细胞在37℃，5％CO₂培养箱中孵育30分钟至1小时。

4.从细胞中取出CytoCalcein Violet 550工作溶液，用HHBS（组分B）洗涤细胞2至3次，并用HHBS替换。

5.在带有545/25nm滤波片的荧光显微镜下或带有525/50nm滤波片的流式细胞仪（Pacific Orange通道）下检测样品。

 

数据分析

图1.在Costar黑壁/透明底96孔板中用CytoCalcein Violet 550染色的HeLa细胞的荧光图像（Ex / Em = 405 / 545nm，用于激发的405紫色滤光片）。

参考文献

Autophagy proteins are not universally required for phagosome maturation
Authors: Marija Cemma, Sergio Grinstein, John H Brumell
Journal: Autophagy (2016): 1440--1446

Differential detection of tumor cells using a combination of cell rolling, multivalent binding, and multiple antibodies
Authors: Ja Hye Myung, Khyati A Gajjar, Jihua Chen, Robert E Molokie, Seungpyo Hong
Journal: Analytical chemistry (2014): 6088--6094

Versatile fabrication of nanoscale sol--gel bioactive glass particles for efficient bone tissue regeneration
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Journal: Journal of Materials Chemistry (2012): 16906--16913

Advanced glycation end-products increase IL-6 and ICAM-1 expression via RAGE, MAPK and NF-$\kappa$B pathways in human gingival fibroblasts
Authors: K Nonaka, Y Kajiura, M Bando, E Sakamoto, Y Inagaki, JH Lew, K Naruishi, T Ikuta, K Yoshida, T Kobayashi
Journal: Journal of Periodontal Research

 

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