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钙黄绿素橙钠盐

英文名称:Calcein Orange™ sodium salt
产品参数
Ex (nm)531Em (nm)545
分子量939.11溶剂DMSO
存储条件在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

钙黄绿素橙钠盐是美国AAT Bioquest生产的用于细胞活力测定的试剂,Calcein AM 是流行的荧光探针之一,用于标记和监测活细胞的细胞功能。然而,Calcein AM 的单一颜色使其无法在多色应用中使用这种有价值的试剂。例如,由于与 GFP 的颜色相同,不可能将 Calcein AM 与 GFP 转染细胞结合使用。为了解决 Calcein AM 的这种颜色限制,我们开发了 Calcein Orange™、Calcein Red™ 和 Calcein Deep Red™。这些新的 Calcein AM 类似物能够与 Calcein AM 结合使用对活细胞进行多色标记和功能分析。非荧光 Calcein Orange™ 二乙酸酯可以很容易地进入活细胞并水解产生强荧光 Calcein Orange™ 染料。 AAT Bioquest 提供 Calcein Orange™ 作为 Calcein Orange™ 二乙酸盐的参考染料。百萤生物是AAT Bioquest 的中国代理商,为您提供优质的钙黄绿素橙钠盐。

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选择指南

Dye Calcein Blue CytoCalcein™ Violet 450 Calcein UltraBlue™ CytoCalcein™ Violet 500 Calcein UltraGreen™ Calcein Calcein Orange™ Calcein Red™ Calcein Deep Red™
原理 在活细胞中,非荧光钙黄绿素 AM 在细胞内酯酶的作用下 AM 酯水解后转化为荧光钙黄绿素产物。
荧光效果 活细胞具有高度荧光,很容易与无荧光的死细胞区分开。
Laser(nm) UV (350) Violet (405) UV (350) Violet (405) Blue (488) Blue (488) Green (532) Yellow (561-568) Red (633-647)
Ex/Em(nm) 354/441 406/445 359/458 420/505 492/514 501/521 531/545 562/576 643/663
是否复用
染料相容性 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和绿色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和绿色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容
样品类型 活细胞
适用仪器 荧光显微镜、荧光酶标仪、流式细胞仪
货号   22007 22012 21908 22013 21905 22003 22009 21900 22011
实验方案

使用细胞活力指标AM酯类

        AM酯是非极性酯,其易于穿过活细胞膜,并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。 AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针加载到活细胞中。 但是,使用AM酯时必须小心,因为它们易于水解,特别是在溶液中。 它们应在使用前重新配制成高质量的无水二甲基亚砜(DMSO)。 DMSO储备溶液可以在20℃下干燥储存并避光。 在这些条件下,AM酯应稳定数月。

        以下是我们推荐的将AM酯加载到活细胞中的方案。 该说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

 

a)在高质量无水DMSO中制备2至5mM AM酯的储备溶液。非离子洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加AM酯的水溶性。

注意:在稀释到上样缓冲液中之前,可将等体积的20%Pluronic®F-127溶液添加到细胞活力指示剂的DMSO储备溶液中。终的Pluronic®F-127浓度约为0.02%。

注意:不建议在Pluronic®F-127存在下长期储存AM酯。

b)在实验当天,要么将细胞活力的固体指示剂溶解在DMSO中,要么将等分的指示剂储备溶液解冻至室温。在您选择的缓冲液(如Hanks和Hepes缓冲液)中制备1至10μM的工作溶液。对于大多数细胞系,建议终浓度范围为4至5μM的细胞活力指标。细胞加载所需指标的确切浓度必须根据经验确定。

c)如果您的细胞含有有机阴离子转运蛋白,可以在细胞培养基中加入丙磺舒(1-2.5 mM)或磺吡酮(0.1-0.25 mM),以减少脱酯化指标的泄漏。在室温或37℃下将细胞与AM酯孵育20分钟至1小时。

d)在不含细胞活力指示剂的缓冲液(含有阴离子转运蛋白抑制剂,如果适用)中洗涤细胞以除去过量的探针。

注意:通过流式细胞术立即分析细胞样品,以确定在零时间没有洗涤的每个细胞的平均荧光。

e)在所需的Ex / Em波长下进行实验 。

 

参考文献

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Toxicokinetics and toxicodynamics of chlorpyrifos is altered in embryos of Japanese medaka exposed to oil sands process-affected water: evidence for inhibition of P-glycoprotein
Authors: Hattan A Alharbi, Jane Alcorn, Ahmed Al-Mousa, John P Giesy, Steve B Wiseman
Journal: Journal of Applied Toxicology (2016)

Spraying respiratory epithelial cells to coat tissue-engineered constructs
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The efficient hemostatic effect of Antarctic krill chitosan is related to its hydration property
Authors: Shuai Wu, Zhuoyao Huang, Jianhui Yue, Di Liu, Ting Wang, Pierre Ezanno, Changshun Ruan, Xiaoli Zhao, William W Lu, Haobo Pan
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