钙离子指示剂BAPTA,AM 超纯级 CAS 126150-97-8
Ex (nm) | - | Em (nm) | - |
分子量 | 764.68 | 溶剂 | DMSO |
存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
关键参数
分子量:764.68
CAS:126150-97-8
溶剂:DMSO
消光系数:N/A
产品介绍
钙离子指示剂BAPTA,AM是美国AAT Bioquest生产的钙离子指示剂,BAPTA AM是BAPTA(1,2-双(邻氨基苯氧基)乙烷-N,N,N',N'-四乙酸)的细胞渗透型,细胞可渗透的钙螯合剂。该BAPTA衍生物用于调节细胞和组织中的钙浓度。BAPTA是钙特异性氨基多羧酸。四个羧酸官能团的存在使得两个钙离子的结合成为可能。羧酸盐配体的广泛灵活性对钙和其他金属离子的配位至关重要。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的钙离子指示剂BAPTA,AM。
操作步骤
1.准备HHBS缓冲液,10%Pluronic®F-127溶液和25 mM Probenecid溶液。
2.在高质量无水DMSO中制备2 mM至5 mM BAPTA,AM * CAS 126150-97-8 *储备液。
2.1BAPTA的量,AM * CAS 126150-97-8 *使用量:1毫克
2.2所需浓度:2 mM
2.3在合适的容器中,将1mg BAPTA,AM * CAS 126150-97-8 *与653.87μL无水DMSO混合。
3.在HHBS中制备含有10μMBAPTA,AM * CAS 126150-97-8 * 4,0.08%Pluronic®F-127和2mM丙磺舒的2X工作溶液。
3.1最终孔内浓度BAPTA,AM * CAS 126150-97-8 *:5μM
3.2Pluronic®F-127的最终井内浓度:0.04%
3.3最终孔内浓度的丙磺舒:1mM
3.4在合适的容器中混合16μLBAPTA,AM * CAS 126150-97-8 *,25.6μL10%Pluronic®F-127和256μL25mM丙磺舒。接下来,添加HHBS或您选择的缓冲液,直到体积为3.2 mL。
注意:对于大多数细胞系,我们建议BAPTA的最终浓度,AM * CAS 126150-97-8 *为4至5μM。
注意:推荐的Pluronic F-127井浓度最终为0.02%至0.04%。
注意:推荐的最终浓度为1至2.5 mM的Probenecid。
4.将100μL染料工作溶液加入已经含有100μL培养基的所需孔中。
4.1该步骤将染料工作溶液从2X稀释至1X,并将每种组分的最终浓度调节至以下:5μMBAPTA,AM * CAS 126150-97-8 *,0.04%Pluronic F-127,1mM丙磺舒。
5.孵育染料
5.1将染料加载板在细胞培养箱中孵育20-120分钟。
5.2将染料加载板在室温下孵育30分钟。
6.用1.0 mM Probenecid准备HHBS缓冲液(或您选择的缓冲液)。
6.1在合适的容器中加入160μL的25mM丙磺舒。接下来,添加HHBS或您选择的缓冲液,直到体积为4 mL。
7.用HHBS缓冲液或您选择的缓冲液替换染料工作溶液,使用1.0 mM Probenecid。
7.1首先,从所需孔中除去200μL染料工作溶液和培养基。
7.2在相同的孔中加入200μL含有1.0mM丙磺舒的HHBS(或您选择的缓冲液)。
8.运行实验
8.1为您的样品添加所需的处理。
8.2以Ex / Em = / nm运行实验。
参考文献
Helicobacter pylori induces IL-1β protein through the inflammasome activation in differentiated macrophagic cells
Authors: Shoichiro Kameoka, Takeshi Kameyama, Takaya Hayashi, Seiichi Sato, Naomi Ohnishi, Takeru Hayashi, Naoko Murata-Kamiya, Hideaki Higashi, Masanori Hatakeyama, Akinori Takaoka
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Journal: Cancer science (2008): 2485--2490
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产品名称 | 货号 |
钙离子指示剂BAPTA,AM | Cat#21001 |