Amplite 比色法醛类定量试剂盒 蓝色

Amplite 比色法醛类定量试剂盒 蓝色是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。近年来对细胞膜脂类过氧化成醛的成因，活性以及毒性研究受到广泛的关注。快速地检测醛类在生物学研究、食品工业、化学研究和环境污染监督中都是一项非常重要的任务。有许多试剂和试剂盒都可以用来定量分析总醛含量。现存的醛类检测法大都基于分离法，如HPLC-MS 或者GC-MS，这种方案成本昂贵、操作繁杂，不适合高通量及经济型的检测要求。Amplite比色法醛类定量检测试剂盒 *蓝色* 利用独有的荧光染料与醛反应产生高亮的蓝色荧光产物。该比色试剂盒提供灵敏的即用即读模式，能检测到低至0-4uM的醛类。试剂盒可以用于96或384微孔板分析，并且无需任何分步骤，就可以轻易地实现自动化。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Amplite 比色法醛类定量试剂盒 蓝色。 

 

适用仪器

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光吸收酶标仪
吸收:	620nm
推荐孔板:	透明底板

样品实验方案

简要概述

1.准备醛标准品和/或测试样品（50μL）
2.添加2X AldeView 蓝色工作溶液（50μL）
3.在室温下孵育20分钟
4.添加AldeView 蓝色增强剂（50μL）
5.在室温下孵育20分钟
6.监测620nm处的吸光度增加

 

溶液制备

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C,避免反复冻融循环。
1.1醛标准溶液（10 mM）：
将1mL测定缓冲液（组分B）加入到醛标准品（组分D）的小瓶中以制备10mM醛标准溶液。

 

2.标准溶液

2.1醛标准溶液

取10mM醛标准溶液，在测定缓冲液（组分B）中以1：100的比例制备100μM醛标准溶液（AS7）。 取100μM醛标准溶液（AS7）并进行1：2连续稀释，得到连续稀释的醛标准品（AS6-AS1）和分析缓冲液（组分B）。

 

3.工作溶液

将5 mL测定缓冲液（组分B）加入一瓶AldeView Blue（组分A）中，制成2X AldeView Blue工作溶液。 注意：对于一个板，5 mL 2X AldeView Blue工作溶液就足够了。 2X AldeView 蓝色工作溶液不稳定，好在2小时内使用。

 

样品分析

表1.在具有透明底部的白色96孔微孔板中的醛标准品和测试样品的布局。 AS =醛标准品（AS1-AS7,1.56至100μM），BL =空白对照，TS =测试样品。

BL	BL	TS	TS
AS1	AS1	...	...
AS2	AS2	...	...
AS3	AS3
AS4	AS4
AS5	AS5
AS6	AS6
AS7	AS7

表2.每个孔的试剂组成

孔	容积	试剂
AS1-AS7	50ul	连续稀释液（1.56至100μM）
BL	50ul	分析缓冲液
TS	50ul	测试样品

1.根据表1和2中提供的布局制备醛标准品（AS），空白对照品（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用12.5μL试剂代替50μL。

2.在醛标准品，空白对照品和测试样品的每个孔中加入50μLAldeView Blue工作溶液，使总醛测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，在每个孔中加入12.5μLAldeView Blue工作溶液，总体积为25μL/孔。

3.在室温下孵育反应20-30分钟，避光。

4.每孔加入50μLAldeView Blue Enhancer（组分C）。 对于384孔板，每孔加入25μLAldeView Blue Enhancer。

5.在室温下孵育反应20分钟，避光。

6.使用吸光度读板仪在620至660 nm（大620 nm）下监测吸光度的增加。

 

参考文献

Aldehyde-mediated protein degradation is responsible for the inhibition of nucleotide excision repair by cigarette sidestream smoke
Authors: Guang Yang, Yukako Komaki, Yuko Ibuki
Journal: Mutation Research/Genetic Toxicology and Environmental Mutagenesis (2018)

Biological Activity of Peptide-conjugated Polyion Complex Matrices Consisting of Alginate and Chitosan
Authors: Chikara Fujimori, Jun Kumai, Kyotaro Nakamura, Yingzi Gu, Fumihiko Katagiri, Kentaro Hozumi, Yamato Kikkawa, Motoyoshi Nomizu
Journal: Peptide Science (2016)

Hepatic Deficiency of Augmenter of Liver Regeneration Exacerbates Alcohol-Induced Liver Injury and Promotes Fibrosis in Mice
Authors: Sudhir Kumar, Jiang Wang, Richa Rani, Chandrashekhar R Gandhi
Journal: PloS one (2016): e0147864

Integrated self-assembling drug delivery system possessing dual responsive and active targeting for orthotopic ovarian cancer theranostics
Authors: Chun-Jui Lin, Chen-Hsiang Kuan, Li-Wen Wang, Hsi-Chin Wu, Yunching Chen, Chien-Wen Chang, Rih-Yang Huang, Tzu-Wei Wang
Journal: Biomaterials (2016): 12--26

Fiber-optic protease sensor based on the degradation of thin gelatin films
Authors: Bastien Schyrr, Stéphanie Boder-Pasche, Réal Ischer, Rita Smajda, Guy Voirin
Journal: Sensing and Bio-Sensing Research (2015): 65--73

 

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