蛋白酶体20S荧光底物(Ac-ANW)2R110
Ex (nm) | 500 | Em (nm) | 522 |
分子量 | 1159.16 | 溶剂 | DMSO |
存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
蛋白酶体20S荧光底物(Ac-ANW)2R110是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,(Ac-ANW)2R110是蛋白酶体20S-beta 5i的选择性荧光底物。非荧光底物产生亮绿色荧光罗丹明110产品,该产品具有可以通过FITC过滤器套件轻松检测到的发射光谱。罗丹明110底物比基于AMC,AFC或4-硝基苯胺的底物敏感得多。蛋白酶体的常见形式是26S蛋白酶体,它包含一个20S核心颗粒结构和两个19S调节帽。所有的20S粒子都由四个堆叠的七聚体环结构组成,它们本身由两种不同类型的亚基组成。α亚基本质上是结构性的,而β亚基主要是催化的。堆叠中的外两个环各由七个α亚基组成,用作调节颗粒对接结构域的分子和N-末端的α亚基形成了一个门,该门阻止了基底不受控制地进入内部空腔。内两个环各由七个β亚基组成,并包含进行蛋白水解反应的蛋白酶活性位点。在哺乳动物中,beta1,beta2和beta5亚基具有催化作用。尽管它们具有共同的机制,但它们具有三种不同的底物特异性,分别被视为胰凝乳蛋白酶样,胰蛋白酶样和肽基-谷氨酰胺肽水解。响应于暴露于促炎信号如细胞因子,特别是干扰素γ,可以在造血细胞中表达表示为β1i,β2i和β5i的替代β形式。beta1,beta2和beta5亚基具有催化作用。尽管它们具有共同的机制,但它们具有三种不同的底物特异性,分别被视为胰凝乳蛋白酶样,胰蛋白酶样和肽基-谷氨酰胺肽水解。响应于暴露于促炎信号如细胞因子,特别是干扰素γ,可以在造血细胞中表达表示为β1i,β2i和β5i的替代β形式。beta1,beta2和beta5亚基具有催化作用。尽管它们具有共同的机制,但它们具有三种不同的底物特异性,分别被视为胰凝乳蛋白酶样,胰蛋白酶样和肽基-谷氨酰胺肽水解。响应于暴露于促炎信号如细胞因子,特别是干扰素γ,可以在造血细胞中表达表示为β1i,β2i和β5i的替代β形式。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的蛋白酶体20S荧光底物(Ac-ANW)2R110。
操作方法
以下说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。
1.在DMSO中制备5至10 mM的储备溶液。
2.准备2X蛋白酶体底物(20至50μM)测定溶液,如下所示:
25至50 ul 底物储备液(10 mM)
100 ul DTT(1M)
400 ul EDTA(100 mM)
10mL Hepes Buffer(25mM),pH = 7.4
3.将等体积的蛋白酶体标准品或样品与 2X 荧光蛋白酶体底物测定溶液(来自步骤 1)混合,并在室温下孵育溶液至少 1 小时。
4.监测荧光使用荧光酶标仪。
参考文献
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Authors: Wenjuan Zhou, Lingling Wei, Ting Xiao, Chunyou Lai, Min Peng, Lingli Xu, Xiangwei Luo, Shaoping Deng, Fengxue Zhang
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Delineation of molecular pathways involved in cardiomyopathies caused by troponin T mutations
Authors: Jennifer E Gilda, Xianyin Lai, Frank A Witzmann, Aldrin V Gomes
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Diclofenac induces proteasome and mitochondrial dysfunction in murine cardiomyocytes and hearts
Authors: Rajeshwary Ghosh, Sumanta K Goswami, Luis Felipe BB Feitoza, Bruce Hammock, Aldrin V Gomes
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Advanced-glycation-end-product-induced formation of immunoproteasomes: involvement of RAGE and Jak2/STAT1
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