Tide Quencher染料(Tide Quencher dyes for FRET assays)
FRET已经被当今生物医学研究和药物发现中越来越多地使用,FRET 是能量从供体分子到受体分子的无辐射传输,供体分子是初吸收能量的染料或发色团,受体是随后将能量转移到的发色团。 这种共振相互作用发生在大于原子间距离的范围内,不会转化为热能和任何分子碰撞。能量的转移导致供体荧光强度和激发态寿命的降低以及受体发射强度的增加。一对相互作用使得 FRET 运动的分子通常被称为供体/受体对。 由于其对距离的敏感性,FRET 已被用于研究分子相互作用。
FRET肽底物 蛋白酶的检测和特定蛋白酶抑制剂的筛选对于发现治疗和管理蛋白酶相关疾病的潜在药物至关重要。 多种供体和受体分子(荧光或非荧光)连接到肽/蛋白质(形成内部淬灭缀合物),并根据氨基酸序列用于检测蛋白酶。 仔细选择供体和受体分子,使受体的吸收与供体的荧光重叠,从而确保荧光通过共振能量转移被淬灭。 底物的酶水解导致供体和受体分子的空间分离,从而恢复供体的荧光。 非荧光猝灭染料 DABCYL 染料对于制备 FRET 肽非常有用。 然而,其对较长波长染料(如荧光素、罗丹明和花青)的低淬灭效率限制了其在开发敏感的荧光 FRET 探针中的应用。 此外,DABCYL 的吸收光谱对环境敏感。 表1. DABCYL淬灭剂参数
非荧光 Tide Quenchers 淬灭剂已针对FRET进行了优化 为了克服与 DABYCL 染料和其他经典猝灭剂相关的问题,我们开发了一系列非荧光 Tide Quencher 染料,覆盖整个可见光谱,具有非常高的 FRET 效率。例如,TQ2 的吸收大值与 FAM 的发射完全匹配,而 TQ3、TQ5 和 TQ7 被证明是 Cy3®、Cy5® 和 Cy7® 的佳猝灭剂。 Tide Quencher 染料是出色的猝灭剂,经过单独优化,可与所有流行的荧光染料(如荧光素、罗丹明和花青)搭配使用。这些 Tide Quencher FRET 受体(例如 TQ1、TQ2、TQ3、TQ4、TQ5、TQ6 和 TQ7)非常适合与我们的 Tide Fluor 染料和经典荧光团(例如 AMCA、EDANS、FAM、TAMRA、 HEX、JOE、TET、ROX、Cy3®、Cy5® 和 Cy7®)一起使用。与我们的 Tide Fluor 供体染料一样,我们的 Tide Quencher 受体染料更具成本效益,与市场上其他类似产品相比,对于您所需的生物应用具有相当甚至更好的性能。
图 1. Tide Quencher 非荧光染料的吸收光谱
Tide Quencher 染料的优势
表2. Tide Quencher 染料光谱特性
*所需缀合物的分子量 = 分子量 + 表中列出的值 表3. Tide Quencher 染料及其替代品
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