Gelite Safe DNA 凝胶染料,最好和最稳定的 DNA 凝胶染料
Gelite Safe DNA 凝胶染料是一种极其灵敏且稳定的荧光染料,用于凝胶电泳中的DNA检测。与剧毒溴化乙锭 (EtBr) 不同,Gelite Safe 危害较小、无细胞毒性和无致突变性,提供比 EtBr 和 SYBR® Safe 更高的灵敏度和更低的背景荧光。 Gelite Safe 独特的光谱特性扩大了其仪器兼容性,包括紫外线和蓝光透射仪、凝胶记录系统和激光扫描仪,其单一配方设计允许在您方便时在绿色或红色通道中进行检测。 Gelite Safe 染色剂可作为浓缩物以水溶液或 DMSO 溶液形式提供,一旦充分稀释,即可无缝替代标准方案中的 EtBr。 Gelite Safe 也适用于毛细管电泳中的 DNA 染色,并与下游应用兼容,包括纯化、克隆和测序。
Gelite Safe——溴化乙锭的替代品 凝胶成像和核酸染料常用于生命科学研究,通过电泳对 DNA 片段进行定性评估。虽然溴化乙锭 (EtBr) 由于其低成本和足够的敏感性多年来一直是主要的凝胶染色剂,但 EtBr 的毒性和致突变危害难以解决且使用不。 Gelite Safe 经过专门配制,可作为 EtBr 的替代品,用于检测琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的 DNA。作为一种不透膜染料,Gelite Safe 不能穿透活细胞并与 DNA 结合,使凝胶几乎无细胞毒性和无致突变性。Gelite Safe与EtBr 和其他染料相比具有更高的灵敏度和多功能性。 的灵敏度 单独而言,Gelite Safe 本质上是无荧光的,在凝胶中表现出很低的背景荧光。与 DNA 结合后,Gelite Safe 表现出比 EtBr 高几个数量级的荧光增强。使用 300 nm 紫外透射仪和 ChemiDoc™ 成像系统 (Bio-Rad®),Gelite Safe 可检测每条带低至 0.5 ng dsDNA(图 1)。无需洗涤步骤是实现佳灵敏度所必需的,并且由于 Gelite Safe 对 DNA 具有特异性,因此在样品中存在 RNA 的应用不会干扰结果。 图1. 使用 Gelite Safe、EtBr 和 SYBR® Safe 在 TBE 缓冲液中的 1% 琼脂糖凝胶中检测 DNA。
更高的性 与 EtBr 和 SYBR® Green 相比,在鼠伤寒沙门氏菌菌株 TA1538 中,在 0.2 µg/板至 10 µg/板的剂量范围内,Gelite Safe 的致突变性非常低,而在艾姆斯试验中引起的突变更少。在所有剂量中,Gelite Safe 仅在用 S9 部分(一种肝脏提取物)后才表现出弱阳性结果。此外,Gelite Safe 的膜不渗透特性可防止染料渗透活细胞并与其 DNA 相互作用,使其几乎无细胞毒性和致癌性。由于其不渗透性,Gelite Safe 对环境也是的,可以快速简单地处理。 图2. Ames 的测试结果数据
更好的仪器兼容性 Gelite Safe 的一个显著特点是其广泛的激发和发射曲线。因为两个吸光度的大值导致了 Gelite Safe 的激发光谱在 ~300 nm 和 ~512 nm,所以它与各种仪器兼容,包括紫外线和蓝光透射仪、凝胶文件系统和激光扫描仪。更重要的是,Gelite Safe 的宽发射光谱允许在绿色或红色通道中进行检测。 Gelite Safe 与 EtBr、GelStar®、Gel Green、Gel Red 和 SYBR® 滤波片组兼容。 Excitation
Emission
图3. 在 DNA 存在下检测的 Gelite Safe DNA 凝胶染料的激发和发射光谱。 Gelite Safe 在 280 nm 的紫外区和 513 nm 的可见区具有激发大值。它可以被配备 254 nm(左黑线)、300 nm(中黑线)或 488 nm(蓝线)激光器的仪器激发。 Gelite™ 具有宽广的发射光谱,在 552 nm 处具有单一发射大值。它可以使用 602/50 nm (EtBr) 或 590/110 nm 滤光片组进行检测。
多功能性 Gelite Safe 适用于检测琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的 DNA。 Gelite Safe 强大的 DNA 结合亲和力允许在电泳之前或之后对凝胶进行染色而无需脱色。为获得佳灵敏度,我们建议使用后染色方法,将凝胶在 Gelite Safe 染色溶液中孵育 30 至 60 分钟,具体取决于您的实验条件(例如凝胶厚度和成分)。 表1. 相关产品
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