AAT Bioquest推荐：涵盖了UV至NIR光谱的mFluor染料
本周，百萤生物为大家推荐的是AAT Bioquest研发生产的mFluor系列染料，它是涵盖了UV至近红外光谱的一系列出色的荧光标记染料，主要用于流式细胞仪及多色流式的配色、补偿等。每种mFluor 染料均可以通过流式细胞仪中通常配备的主要激光线之一进行 佳激发，例如405 nm，488 nm，532 nm，561 nm或633 nm激光线。与藻胆蛋白PE，APC等相比，mFluor 染料是免疫表型，是FACS和其他流式应用染料的 佳替代品。mFluor 染料包含多种产品，包括活性染料和抗体标记试剂盒，以及用于信号放大的mFluor 链霉亲和素偶联物和用于凋亡检测的Annexin V-mFluor 偶联物。图1.使用膜联蛋白V-mFluor 450偶联物进行活/死细胞分析
mFluor系列染料的特点
- 简单、快速的标记生物分子且结合率高
- 的亮度、光稳定性和溶解性
- 适用的pH范围广、对pH敏感度低
- 多色流式版面设置的灵活性高、选择性多样化
- 适用于大多数检测仪器
mFluor 反应性染料和ReadiLink快速抗体标记试剂盒
图2.将HL-60细胞用1 µg / mL小鼠IgG（绿色）或1 µg / mL小鼠抗人HLA-ABC（W6 / 32 mAb）（红色）染色，然后分别加入山羊抗小鼠IgG-mFluor 紫色450偶联物进行流式细胞仪分析。使用ACEA NovoCyte流式细胞仪在Pacific blue通道中监测荧光信号。
mFluor 反应性染料可以以 小的自猝灭性共价标记到蛋白质、抗体和其他生物分子上，产生用于流式细胞术的强荧光和光稳定结合物。mFluor 活性染料形式包括胺反应性琥珀酰亚胺酯和硫醇反应性马来酰亚胺等。为了更好使用琥珀酰亚胺酯或马来酰亚胺的mFluor 染料来标记抗体，请参考我们的相关说明书。
mFluor 染料的光谱特性
| mFluor 染料 | Ex / Em（nm） | 激发波长（nm） | 滤波器 | ε 1 | Φ 2 | CF在260 nm 3 | 280 nm处的CF 4 |
| mFluor UV375 | 354/388 | 355 | 379/28 | 35,000 | 0.94 | 0.099 | 0.138 |
| mFluor Violet 450 | 406/445 | 405 | 450/40 | 25,000 | 0.92 | 0.338 | 0.078 |
| mFluor UV460 | 362/461 | 355、375 | 450/40 | 15,000 | 0.86 | 0.35 | 0.134 |
| mFluor Violet 500 | 426/497 | 405 | 525/50 | 35,000 | 0.81 | 0.769 | 0.365 |
| mFluor Violet 510 | 409/504 | 405 | 525/50 | 30,000 | 0.86 | 0.464 | 0.366 |
| mFluor Violet 540 | 400/532 | 405 | 525/50 | 15,000 | 0.64 | 1.392 | 0.529 |
| mFluor Blue 570 | 552/564 | 488、532、561 | 575/26 | 120,000 | 0.08 6 | 0.228 | 0.179 |
| mFluor Green 620 | 521/617 | 488、532、561 | 610/20 | 50,000 | 0.06 * | 0.895 | 0.569 |
| mFluor Yellow 630 | 546/625 | 488、532、561 | 61/20 | 110,000 | 0.01 * | 0.283 | 0.413 |
| mFluor Red 700 | 657/694 | 633、635、640 | 730/45 | 250,000 | 0.029 6 | 0.135 | 0.127 |
| mFluor Red 780 | 631/768 | 633、635、640 | 780/60 | 70,000 | 0.034 6 | 0.101 | 0.116 |
注：
- Ext. Coeff.=在其 大吸收波长处的消光系数。消光系数的单位为cm -1 M -1。
- FQY =在水溶性缓冲液（pH 7.2）中的荧光量子产率。
- 260 nm处的CF是校正因子，用于 染料对260 nm处的吸光度的影响。
- 280 nm处的CF是校正因子，用于 染料对280 nm处的吸光度的影响（用于肽和蛋白质标记）。
- 与蛋白质偶联后，荧光强度明显增加。
- 与抗体结合后，荧光量子产率可能增加。
市场常见的与mFluor等效的产品
| 如果您在使用以下产品 | 请尝试使用我们的mFluor系列产品 |
| BD Horizon™ BUV395 | mFluor UV375 |
| Pacific Blue® | mFluor Violet 450 |
| Hoechst 33342 or Marina Blue® | mFluor UV460 |
| Pacific Green™ or BD Horizon™ V500 | mFluor Violet 500 |
| AmCyan | mFluor Violet 510 |
| Pacific Orange™ or Krome Orange™ | mFluor Violet 540 |
| Phycoerythrin (PE) | mFluor Blue 570 |
| APC-Cy5.5®, APC-Alexa Fluor® 680, or APC-Alexa Fluor® 700 tandem dyes | mFluor Red 700 |
| APC-Cy7®, APC-Alexa Fluor® 750, or APC-H7 tandem dyes | mFluor Red 780 |
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