Portelite 荧光总核酸定量试剂盒 *针对 Cytocite 和 Qubit 荧光计进行了优化*

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产品优势

1.兼容CytoCite™ 及Qubit® 荧光检测系统

2.灵敏度高

 

适用范围

用于快速测定样品中核酸总量

 

产品介绍

Portelite™ 荧光法总核酸定量检测试剂盒专为快速测定样品中核酸总量而设计，可同时检测双链DNA（dsDNA）、单链DNA（ssDNA）及RNA。该试剂盒提供全套必需组分，包含Helixyte™ Green ssDNA检测试剂、稀释缓冲液及预稀释DNA标准品

Helixyte™ Green试剂是一种高灵敏度荧光核酸探针，适用于测定可能含有双链DNA、单链DNA、RNA及长链寡核苷酸的样品中核酸总量。该试剂可非选择性结合双链DNA、单链DNA与RNA。本试剂盒经过专门优化，兼容CytoCite™ 及Qubit® 荧光检测系统，可实现精准的核酸总量测量。

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量子位荧光计
Ex:	480 nm
Em：	530 nm
规格:	0.2 mL PCR管

 

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CytoCite 荧光计
Ex:	480 nm
Em：	530 nm
规格:	0.2 mL PCR管

实验方案

概述

1.准备 Helixyte Green All 工作溶液

2.在每个 0.2 mL PCR 管中加入 190 µL 1X Helixyte Green All 工作溶液

3.在每管中加入 10 µL 核酸标准品或测试样品

4.在室温下孵育 2 分钟

5.使用 CytoCite 荧光计或 Qubit 荧光计检测荧光强度

 

溶液制备

Helixyte Green ALL工作溶液

用检测缓冲液（组分 B）将 Helixyte Green All 试剂（组分 A）稀释 200 倍。 例如，要为 5 个样品制备足够的工作溶液，将 5 μL Helixyte Green All（组分 A）添加到 1 mL 检测缓冲液（组分 B）中。

注意：通过用箔纸覆盖或将其置于黑暗中来保护工作溶液免受光照。 建议在塑料容器而不是玻璃容器中制备溶液，因为染料可能会吸附到玻璃表面。 为获得好的效果，该溶液应在稀释后几小时内使用。

 

操作步骤 

样品体积的可接受范围是 1~20 μL，具体取决于核酸样品的估计浓度。

以下方案是基于 10 μL 的样品体积生成的。

1.将 190 µL 1X Helixyte Green All 工作溶液添加到每个 Cytocite 样品管 (#CCT100) 或等效的 0.2 mL PCR 管中。

注意 使用薄壁、聚丙烯、透明的 0.2 mL PCR 管，例如 AAT Cat#CCT100。

2.每管加入10 μL核酸标准品或测试样品，涡旋2~3秒混匀。

3.在室温下孵育所有管子 2 分钟。

4.将样品插入 CytoCite 或 Qubit 并使用绿色荧光通道检测荧光强度。

 

标准校准曲线的制作

对于 Portelite 检测，您可以选择使用核酸标准品制作校准曲线。 这是生成定制 DNA 标准曲线的简要方案。

1.进行 1:2 连续稀释：将 10 ng/μL 核酸标准品 #2（组分 D）添加到检测缓冲液（组分 B）中以获得 10、5、2.5、1.25、0.62、0.31、0.15 ng/μL DNA 标准品 稀释。

2.将 190 µL Helixyte Green All 工作溶液加入每个管中。

3.将 10 µL 标准品加入 0.2 mL PCR 管中，然后涡旋混合 2~3 秒。

4.在室温下孵育反应 2 分钟。

5.将样品插入 CytoCite 并使用绿色荧光通道检测荧光强度。