Helixyte™ 绿色荧光法总核酸定量检测试剂盒 *专为酶标仪优化*

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产品优势

1.非特异性结合各类核酸分子

2.灵敏度高

适用范围

用于总核酸定量检测

产品介绍

Helixyte™ 绿色荧光法总核酸定量检测试剂盒专为简便、精准地测定各类核酸总量而设计，包括双链DNA（dsDNA）、单链DNA（ssDNA）及RNA。该试剂盒提供全套必需试剂，含Helixyte™ Green All荧光探针、稀释缓冲液及预稀释DNA标准品。

Helixyte™ Green All是一种高灵敏度荧光核酸探针，可精准检测样本中可能存在的dsDNA、ssDNA、RNA及长链寡核苷酸等核酸总量。该探针可非特异性结合各类核酸分子，包括dsDNA、ssDNA和RNA。本试剂盒经过特殊优化，适用于通过荧光酶标仪进行核酸总量测定。

实验方案

概述

1.添加 100 µL 核酸标准品或测试样品
2.添加 100 µL Helixyte Green ALL溶液
3.在室温下孵育 5-10 分钟
4.检测Ex/Em=490/525 nm 处的荧光强度

注：以下方案是使用 Helixyte Green All 定量总核酸含量的示例。 打开前让所有成分升温至室温。 没有关于 Helixyte Green All（总核酸染色剂）的致突变性或毒性的数据。 由于该试剂与核酸结合，因此应将其视为潜在的诱变剂并小心处理。 应特别小心处理 DMSO 原液，因为已知 DMSO 可促进有机分子进入组织。

溶液制备
核酸标准品
将 10 uL 100 ug/mL 核酸标准溶液（组分 C）加入 190 uL 检测缓冲液（组分 B）中，得到 5 ug/mL 标准溶液，然后进行 1:3 稀释，得到连续稀释的核酸标准溶液（ NS1-NS7)。请使用AAT Bioquest连续稀释计算器以方便数据处理。

Helixyte Green ALL工作溶液
将 100 μL Helixyte Green All（组分 A）加入 10 mL 检测缓冲液（组分 B）中，制备 Helixyte Green All 工作溶液。 通过用箔纸覆盖或将其置于黑暗中来保护工作溶液免受光照。
注意：建议在塑料容器而不是玻璃容器中制备工作溶液，因为染料可能会吸附到玻璃表面。 为获得佳效果，该溶液应在稀释后几小时内使用。
注意：10 mL 的工作溶液对于一个 96 孔板就足够了。

操作步骤

表 1. 96 孔黑色微孔板中核酸标准品和测试样品的布局。 NS= 核酸标准品（NS1 - NS7，1667 至 2.3 ng/mL）； BL=空白； TS=测试样品

表2.各孔试剂组成

1.根据表 1 和 2 中提供的布局准备核酸标准 (NS)、空白对照 (BL) 和测试样品 (TS)。对于 384 孔板，每孔使用 25 µL 试剂，而不是 100 µL。
2.将 100 µL Helixyte Green All 工作溶液加入核酸标准品、空白对照和测试样品的每个孔中，使测定体积为 200 µL/孔。 对于 384 孔板，将 25 µL Helixyte Green All 工作溶液添加到每个孔中，以获得 50 µL/孔的总体积。
3.在室温下孵育反应 5 到 10 分钟，避光。
4.使用 Ex/Em = 490/525 nm（Cutoff在 515 nm ）处的荧光酶标仪检测荧光增加。