FITC-xtra 异硫氰酸荧光素
英文名称：FITC-xtra
产品参数
| Ex (nm) | 498 | Em (nm) | 526 |
| 分子量 | 620.52 | 溶剂 | DMSO |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
产品概述
产品货期
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产品优势
1.光稳定性好
2.荧光不受pH（4-10）影响
适用范围
用于制备蛋白质缀合物。
产品简介
AAT Bioquest生产的FITC-xtra 异硫氰酸荧光素具有与FITC几乎相同光谱特性，温和缀合条件下比FITC的缀合产率高。在相同条件下，FITC-xtra抗体缀合物提供比FITC标记的缀合物的信号/背景比高得多。
实验方案
实验方案
（该标记方案适用山羊抗小鼠IgG与FITC-xtra的偶联物）
准备蛋白质储备溶液（溶液A）
将100μL反应缓冲液（例如，1M碳酸钠溶液或pH~9.0的1M磷酸盐缓冲液，）与900μL目标蛋白溶液（例如抗体，蛋白质浓度> 2 mg / ml）混合，得到1 mL蛋白标记储备液。
注：1.蛋白质溶液（溶液A）的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0，则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液，将pH调节至8.0-9.0的范围。
2.应将蛋白质溶于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水（PBS）中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中，则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析，以除去用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐（例如硫酸铵和乙酸铵）。
3.不纯的抗体、牛血清蛋白（BSA）和明胶稳定的抗体不能很好的被标记。叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞，以获得标记结果。
4.如果蛋白质浓度小于2mg / mL，偶联效率明显降低。为获得好的标记效率，建议蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。
3.不纯的抗体、牛血清蛋白（BSA）和明胶稳定的抗体不能很好的被标记。叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞，以获得标记结果。
4.如果蛋白质浓度小于2mg / mL，偶联效率明显降低。为获得好的标记效率，建议蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。
准备染料储备溶液（溶液B）
将无水DMSO加入到FITC-xtra小瓶中以制备10-20mM储备溶液，通过移液或涡旋混合均匀。
注：在开始缀合之前准备染料储备溶液（溶液B）随配随用，保证使用的溶液的新鲜。染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。溶液B可以在不受光照和潮湿的情况下储存在冰箱中两周。
注：在开始缀合之前准备染料储备溶液（溶液B）随配随用，保证使用的溶液的新鲜。染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。溶液B可以在不受光照和潮湿的情况下储存在冰箱中两周。
准备所需的蛋白质缀合物
注：每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例，这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能对其结合亲和力产生不利影响，而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定染料/蛋白质比率。通常，对于大多数染料 - 蛋白质缀合物，推荐使用4-6种染料/蛋白质。
1.使用10：1摩尔比的溶液B（染料）/溶液A（蛋白质）作为起始点：将5μl染料储备溶液（溶液B，假设染料储备溶液为10 mM）加入到蛋白质的小瓶中溶液（95μl溶液A），有效摇动。假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD，蛋白质的浓度为~0.05mM。
注意：蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10％。
注意：蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10％。
2.进行缀合反应。在有效摇动下将适量的染料储备溶液（溶液B）加入到蛋白质溶液（溶液A）的小瓶中。继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。
3.重复＃3.2，溶液B /溶液A的摩尔比为5：1; 如果需要，分别为15：1和20：1。
4.使用预制的旋转柱或其他技术纯化所需的缀合物。
5.计算上述4种缀合物的染料/蛋白质比（DOS）。
试剂应用文献
Determination of sodium benzoate in food products by fluorescence polarization immunoassay
Authors: Ren, Linlin and Meng, Meng and Wang, Peng and Xu, Zhihuan and Eremin, Sergei A and Zhao, Junhong and Yin, Yongmei and Xi, Rimo
Journal: Talanta (2014): 136--143
Authors: Ren, Linlin and Meng, Meng and Wang, Peng and Xu, Zhihuan and Eremin, Sergei A and Zhao, Junhong and Yin, Yongmei and Xi, Rimo
Journal: Talanta (2014): 136--143
Complexes containing cationic and anionic pH-sensitive liposomes: comparative study of factors influencing plasmid DNA gene delivery to tumors
Authors: Chen, Yan and Sun, Ji and Lu, Ying and Tao, Chun and Huang, Jingbin and Zhang, He and Yu, Yuan and Zou, Hao and Gao, Jing and Zhong, Yanqiang
Journal: International journal of nanomedicine (2013): 1573
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Journal: International journal of nanomedicine (2013): 1573
Swimming behavior of the monotrichous bacterium Pseudomonas fluorescens SBW25
Authors: Ping, Liyan and Birkenbeil, Jan and Monajembashi, Shamci
Journal: FEMS microbiology ecology (2013): 36--44
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Journal: FEMS microbiology ecology (2013): 36--44
