Buccutite 过氧化物酶(HRP)抗体偶联试剂盒 适合标记25ug蛋白
Ex (nm) | - | Em (nm) | - |
分子量 | - | 溶剂 | - |
存储条件 | 在2-8度冷藏保存, 避免光照 |
Buccutite 过氧化物酶(HRP)抗体标记试剂盒提供了一种以微观方式标记抗体的便捷方法。蛋白质 - 蛋白质缀合通常用双功能接头(例如常用的SMCC)进行,在每个末端具有不同的反应性以连接两种不同的蛋白质。交联剂的一端(通过NHS酯)与氨基酸赖氨酸和N-末端中发现的胺(-NH2)反应,另一端(通过马来酰亚胺)与氨基酸中发现的硫醇基团(-SH)反应。半胱氨酸。然而,SMCC修饰的蛋白质极不稳定并且通常是自身反应性的,因为蛋白质通常含有胺和硫醇基团,其引起显着量的均聚交联。此外,量化蛋白质上马来酰亚胺基团的数量是相当困难和繁琐的。 Buccutite 过氧化物酶(HRP)抗体偶联试剂盒设计用于直接从蛋白质,肽和含有游离氨基的其他配体制备辣根过氧化物酶(HRP)偶联物。我们的试剂盒中提供的HRP已使用我们专有的接头Buccutite FOL预先,可直接用于缀合。 Buccutite FOL活化的HRP在极其温和的中性条件下容易与含有Buccutite MTA的分子反应,无需任何催化剂。与常用的SMCC和其他类似技术相比,我们的Buccutite 生物共轭系统更易于使用。它能够以更高的效率和产量实现生物分子的更快和定量缀合。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Buccutite 过氧化物酶(HRP)抗体偶联试剂盒。
实验方案
操作步骤
1.运行Antibody-Buccutite MTA反应
1.1将抗体溶液直接加入到Buccutite MTA(组分B)的小瓶中,并通过反复移液几次将其充分混合或将小瓶涡旋几秒钟。
1.2将抗体-Buccutite MTA反应混合物在室温下保持30-60分钟。 注意:如果需要,抗体-Buccutite MTA反应混合物可以旋转或摇动更长时间。
2.制备抗体-HRP缀合物
2.1通过向Buccutite FOL活化的HRP(组分A)的小瓶中加入50μLddH2O制备Buccutite FOL活化的HRP溶液,通过反复移液几次充分混合或将小瓶涡旋几秒钟。
2.2将整瓶Buccutite FOL活化的HRP溶液混合到纯化的抗体-Buccutite MTA溶液(来自步骤纯化抗体-Buccutite MTA溶液)中,充分混合并在室温下旋转混合物1小时。
2.3抗体-HRP结合物现在可以使用了。 注意:立即使用时,抗体-HRP结合物需要用您选择的缓冲液稀释。 注意:对于长期储存,需要浓缩或冷冻干燥抗体-HRP结合物溶液。
3.抗体-HRP共轭物的储存
抗体缀合物应在载体抗体(例如0.1%牛血清白蛋白)存在下以> 0.5mg / mL储存。 当在2mM叠氮化钠存在下储存并避光时,抗体-HRP缀合物溶液可以在4℃下储存两个月而没有显着变化。 对于更长时间的储存,可以将抗体-HRP缀合物冻干并在≤-20℃下储存。
参考文献
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