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Transfectamine 5000转染试剂

英文名称:Transfectamine™ 5000 Transfection Reagent
Transfectamine 5000转染试剂
价格 496
产品规格
50 uL

产品货号
产品参数
Ex (nm)-Em (nm)-
分子量N/A溶剂Water
存储条件在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Transfectamine 5000转染试剂是美国AAT Bioquest生产的转染试剂,Transfectamine 5000转染试剂是一种功能强大且用途广泛的转染试剂,可将核酸引入真核细胞,引入动物细胞。它可以有效地将各种有效载荷转染到各种贴壁和悬浮细胞系中。它可用于质粒DNA转染以及基于siRNA和shRNA的基因敲低实验和基因表达研究。它对所有转染细胞均提供的转染效率。Transfectamine 5000的低毒性也使转染细胞具有更高的生存能力。与大多数其他转染试剂相比,Transfectamine 5000更易于使用,并且不需要特殊的介质。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Transfectamine 5000转染试剂。 

实验方案

样品实验方案

简要概述

1.准备细胞进行转染

2.准备Transfectamine 5000-DNA混合物

3.将Transfectamine 5000-DNA混合物添加到细胞培养物中

4.过夜培养

5.用适当的方法分析转染效率

 

溶液制备

1.工作溶液配制

1.1将2.5ug DNA与200uL无血清培养基混合。

1.2在步骤1中添加7.5 uL Transfectamine 5000。

1.3充分混合并在室温下孵育20分钟。 注意:Transfectamine 5000和DNA的比例需要针对不同的细胞系进行优化,通常:Transfectamine 5000转染试剂(uL)与DNA(ug)的比例= 3-5 uL至1ug

6孔板与10cm板样品方案

组成 6孔板(每孔) 10厘米板
新鲜培养基 2ml 6ml
质粒 ~2.5ug 7.5-10ug
无血清培养基 200ul 600ul
Transfectamine 5000转染试剂 7.5ul ~22.5ul

 

样品示例及操作

1.细胞培养准备

1.1转染时将细胞培养至约90%融合。

1.2转染前用新鲜的生长培养基替换。 例如,对于6孔板,每孔用2 mL培养基替换,对于10 cm板,用6 mL培养基替换。

2.转染方案

将Transfectamine 5000 -DNA混合物添加至培养板并培养过夜。 注意:重组蛋白早可在转染后16小时开始检测。转染后72〜96小时可观察到大表达水平。

图1.使用Transfectamine 5000,Lipofectamine 2000和Lipofectamine 3000试剂在HeLa细胞中的转染效率比较。 每种试剂用于以96孔格式转染HeLa细胞,转染后24小时分析GFP表达。 与Lipofectamine 2000和Lipofectamine 3000试剂相比,Transfectamine 5000转染试剂可提供更高的GFP转染效率。

 

参考文献

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