iFluor 647小麦胚芽凝集素(WGA)探针
Ex (nm) | 656 | Em (nm) | 670 |
分子量 | N/A | 溶剂 | Water |
存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
产品货期: 现货 |
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适用范围: 该产品用于标记细胞膜(如:活细胞、固定细胞、组织切片、酵母、革兰氏阳性细菌及真菌等 ),从而进行荧光成像和分析。也可用于免疫荧光(IF)、免疫组织化学(IHC)和流式细胞术(FC)。 |
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产品优势: 1.应用广泛; 2.不受膜电位控制; 3.用于细胞膜表面的标记,有助于膜结构的成像; |
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产品简介: AAT Bioquest 生产的小麦胚凝集素(WGA)能与N-乙酰葡萄糖胺和唾液酸结合,是目前研究最多且最有用的凝集素之一。 |
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注意事项: 该产品不适用于革兰氏阴性细菌。 |
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查看光谱 | |
适用仪器: |
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荧光显微镜 | |
Ex: | Cy5 滤波片组 |
Em: | Cy5 滤波片组 |
推荐孔板: | 黑色透明底板 |
样品分析方案
溶液配制
储备溶液配制
iFluor 647 小麦胚芽凝集素 (WGA) 缀合物储备液 (200X)
将 500 µL ddH2O 添加到粉末小瓶中,制成 2 mg/mL 的储备溶液。
注意:重新配制的缀合物溶液可在 2-8 °C 下短期储存,或在 -20 °C 下长期储存。
工作溶液配制
iFluor 647小麦胚芽凝集素 (WGA) 缀合物工作溶液 (1X)
将 5 μL 200X WGA 储备溶液添加到 1 mL HHBS 缓冲液中。
注意:不同细胞系的优化染色浓度可能不同。 活细胞的推荐起始浓度为 5-10 µg/mL。
操作方案
活细胞染色
1. 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。
2. 添加 100 µL iFluor 647-WGA 工作溶液。
3. 将细胞与 WGA 工作溶液在 37°C 下孵育 10-30 分钟。
4. 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。
5. 使用 Cy5 滤波片组在荧光显微镜上成像细胞。
固定细胞染色
1. 用含4%甲醛的PBS溶液固定细胞。
注意:对于固定细胞膜染色,建议在没有透化步骤的情况下进行染色。固定后透化步骤会导致细胞内区室染色,如高尔基体和内质网 (ER) 结构染色。
2. 添加 100 µL iFluor 647-WGA 工作溶液。
3. 在室温下,用 WGA 工作溶液孵育细胞 10-30 分钟。
4. 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。
5. 使用 Cy5 滤波片组在荧光显微镜上成像细胞。
图示
图 1. 使用 iFluor 647-小麦胚芽凝集素 (WGA) 缀合物以 5 µg/mL的浓度在活细胞(Hela细胞) 染色 30 分钟,然后用 Hoechst 33342(Cat# 17535)染色。使用带Cy5和DAPI滤波片组的荧光显微镜成像。