iFluor 488小麦胚芽凝集素（WGA）探针

样品分析方案

溶液配制

储备溶液配制 

iFluor 488 小麦胚芽凝集素 (WGA) 缀合物储备液 (200X)

将 500 µL ddH₂O 添加到粉末小瓶中，制成 2 mg/mL 的储备溶液。

注意：重新配制的缀合物溶液可在 2-8 °C 下短期储存，或在 -20 °C 下长期储存。

工作溶液配制 

iFluor 488-小麦胚芽凝集素 (WGA) 缀合物​​工作溶液 (1X)

将 5 μL 200X WGA 储备溶液添加到 1 mL HHBS 缓冲液中。

注意：不同细胞系的优化染色浓度可能不同。 活细胞的推荐起始浓度为 5-10 µg/mL。

操作方案

活细胞染色

1. 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。

2. 添加 100 µL iFluor 488-WGA 工作溶液。

3. 将细胞与 WGA 工作溶液在 37°C 下孵育 10-30 分钟。

4. 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。

5. 使用 FITC 滤波片组在荧光显微镜上成像细胞。

固定细胞染色

1. 用含4%甲醛的PBS溶液固定细胞。

注意：对于固定细胞膜染色，建议在没有透化步骤的情况下进行染色。固定后透化步骤会导致细胞内区室染色，如高尔基体和内质网 (ER) 结构染色。

2. 添加 100 µL iFluor 488-WGA 工作溶液。

3. 在室温下，用 WGA 工作溶液孵育细胞 10-30 分钟。

4. 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。

5. 使用 FITC 滤波片组在荧光显微镜上成像细胞。

试剂应用文献