MitoLite 线粒体绿色荧光探针
| Ex (nm) | 508 | Em (nm) | 528 |
| 分子量 | 671.88 | 溶剂 | DMSO |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
MitoLite 线粒体绿色荧光探针是美国AAT Bioquest生产的用于染色线粒体的荧光探针， MitoLite Green FM 与 MitoTracker Green FM（M7514，ThermoFisher）是同一分子。它是绿色荧光线粒体染色剂。与其他 MitoLite 探针不同，MitoLite Green FM 似乎定位于线粒体，更少依赖于线粒体膜电位。该染料对活细胞进行染色，但醛固定后不能很好地保留。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的MitoLite 线粒体绿色荧光探针。
适用仪器
| 流式细胞仪 | |
| Ex: | 488 nm |
| Em： | 530/30 nm |
| 通道: | FITC 通道 |
|
荧光显微镜 |
|
| Ex: | FITC 滤波片组 |
| Em： | FITC 滤波片组 |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
样品实验方案
简要概述
1.准备1 mM MitoLite Green FM储备溶液
2.准备20-200 nM MitoLite Green FM染色液
3.从细胞中去除生长培养基
4.向细胞添加MitoLite Green FM染色液
5.在37°C孵育30分钟
6.洗涤细胞并用1x Hanks和20mM Hepes Buffer（HH缓冲液）代替
7.使用带有FITC滤光片组的荧光显微镜观察细胞
溶液配制
1.储备溶液配制
所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
MitoLite Green FM储备溶液：
将一小瓶MitoLite Green FM（50 ug）溶于74 uL优质无水二甲基亚砜（DMSO）中，制成1 mM储备液。 注意：将储备溶液保持在≤–15°C的温度下冷冻并避光。
2.工作溶液配制
MitoLite Green FM染色液：
在HH缓冲液中稀释1 mM MitoLite Green FM储备溶液至工作浓度。 工作浓度可以在20–200 nM的范围内。
样品示例及操作
1.1生长细胞以达到所需的融合度。
1.2从细胞中去除生长培养基。
1.3向每个孔中添加MitoLite Green FM染色溶液。
1.4在37°C下孵育30分钟。
1.5洗涤细胞，并用1x Hanks和20mM Hepes Buffer（HH缓冲液）代替。
1.6使用带有FITC滤光片组的荧光显微镜观察细胞。 注意：染色方案对Hela细胞系有益，可能需要针对特定细胞类型进行优化。
2.1离心细胞至沉淀并吸出上清液。
2.2在MitoLite Green FM染色溶液中轻轻重悬细胞。
2.3在37°C下孵育30分钟。
2.4离心细胞，除去上清液，然后将细胞重悬在新鲜的HH缓冲液中。
2.5可以通过流式细胞仪（530/30 nm滤光片-FITC通道）或荧光显微镜（FITC滤光片组）分析细胞。
图1 使用带有FITC滤光片组（绿色）的荧光显微镜，用MitoLite Green FM染色的HeLa细胞的荧光图像。 活细胞与溶酶体染料LysoBrite Red（Cat＃22645，红色）和细胞核染料Nuclear Violet LCS1（Cat＃17543，蓝色）共同染色。
参考文献
the influence of platelets and a comparison of analytical approaches
Authors: Hopkinson, K.; Williams, E. A.; Fairburn, B.; Forster, S.; Flower, D. J.; Saxton, J. M.; Pockley, A. G., A MitoTracker Green-based flow cytometric assay for natural killer cell activity: variability
Journal: Exp Hematol (2007): 350-7
Efficacy of MitoTracker Green and CMXrosamine to measure changes in mitochondrial membrane potentials in living cells and tissues
Authors: Pendergrass, W.; Wolf, N.; Poot, M.
Journal: Cytometry A (2004): 162-9
Mitotracker green is a P-glycoprotein substrate
Authors: Marques-Santos, L. F.; Oliveira, J. G.; Maia, R. C.; Rumjanek, V. M.
Journal: Biosci Rep (2003): 199-212
MitoTracker Green labeling of mitochondrial proteins and their subsequent analysis by capillary electrophoresis with laser-induced fluorescence detection
Authors: Presley, A. D.; Fuller, K. M.; Arriaga, E. A.
Journal: J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci (2003): 141-50
and MitoTracker Green is affected by mitochondrial membrane potential altering drugs
Authors: Keij, J. F.; Bell-Prince, C.; Steinkamp, J. A., Staining of mitochondrial membranes with 10-nonyl acridine orange, MitoFluor Green
Journal: Cytometry (2000): 203-10
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