Cell Navigator 细胞膜染色试剂盒 橙色荧光
Ex (nm) | 555 | Em (nm) | 573 |
分子量 | - | 溶剂 | - |
存储条件 | - |
Cell Navigator 细胞膜染色试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于染色细胞膜的试剂盒,Cell Navigator 细胞膜染色试剂盒可快速,均匀标记质膜,而没有凝集素表现出的细胞类型差异。它可以用作HCS(高含量筛选)的分割工具,以及对细胞质膜进行染色以用于标准荧光显微镜检查。试剂盒中使用的染色剂可以固定,但不能通透,因此不适用于还涉及通过抗体探测内部靶标的实验。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Navigator 细胞膜染色试剂盒。
适用仪器
荧光显微镜 | |
Ex: | TRITC 滤波片组 |
Em: | TRITC 滤波片组 |
推荐孔板: | 黑色透明底板 |
样品实验方案
简要概述
1.在生长培养基中准备细胞
2.将细胞与Cellpaint Orange工作溶液在37ºC下孵育10-20分钟
3.在荧光显微镜下于Ex / Em = 540/590 nm(TRITC滤光片组)分析细胞
溶液配制
1.储备溶液配制
所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 Cellpaint 橙色储备溶液(500X):
将100 µL DMSO(组分C)添加到Cellpaint Orange(组分A)小瓶中,制成500X Cellpaint Orange储备液。 注意:如果管密封严密,未使用的500X Cellpaint Orange储备液可以在≤-20ºC下保存一个月。 避光。
2.工作溶液配制
将20 µL 500X Cellpaint Orange储备溶液添加到10 mL的测定缓冲液(组分B)中,并充分混合以制成Cellpaint Orange工作溶液。 这种Cellpaint Orange工作溶液在室温下至少可稳定8小时。 避光。 注意:20 µL 500X Cellpaint Orange 500X储备溶液足以用于一个96孔板。
样品示例及操作
2.避光保存,在37°C下孵育细胞10-20分钟。 注意:细胞膜探针的浓度取决于具体应用。 可以根据特定的细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来改变染色条件。
3.除去每个孔中的Cellpaint Orange工作溶液。
4.用生理缓冲液(例如HHBS,PBS或您选择的缓冲液)洗涤细胞3次。
5.染色后固定细胞(可选)。 用4%甲醛固定细胞15-30分钟。 用生理缓冲液洗涤细胞三遍。
6.使用带有TRITC滤光片组(Ex / Em = 540/590 nm)的荧光显微镜观察细胞中的荧光信号。
图1.在96孔黑色透明底板中,用Cell Navigator 细胞膜染色试剂盒*橙色荧光*染色的HL-60细胞的荧光图像。 使用配备有TRITC滤波片的荧光显微镜使细胞成像。
参考文献
Insulin receptor based lymphocyte trafficking in the progression of type 1 diabetes
Authors: Michael P Morran, Ali G Al-Dieri, Andrea L Nestor-Kalinoski, Richard K Jordan, Nirdesh K Gupta, Marcia F McInerney
Journal: Journal of Biological Methods (2018): e85
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