Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒 绿色荧光
Ex (nm) | 491 | Em (nm) | 516 |
分子量 | - | 溶剂 | - |
存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒是一套荧光成像工具,用于标记亚细胞细胞器,如膜,溶酶体,线粒体,细胞核等。活细胞区的选择性标记为研究空间细胞事件提供了一种强大的方法。
该特定试剂盒设计用于标记具有绿色荧光的固定细胞中的F-肌动蛋白。该试剂盒使用绿色荧光鬼笔环肽缀合物,其选择性结合F-肌动蛋白。该绿色荧光鬼笔环肽缀合物是F-肌动蛋白的高亲和力探针。当以纳摩尔浓度使用时,鬼笔环肽是用于标记,鉴定和定量甲醛固定和透化组织切片,细胞培养物或无细胞实验中的F-肌动蛋白的方便探针。 该试剂盒为所有必需组件提供优化的染色方案,该方案功能强大,只需很少的手动操作时间。它是保存特定细胞荧光图像的绝佳工具。鬼笔环肽缀合物具有与FITC类似的光谱性质(Ex / Em = 500 / 520nm)。它也可以用于使用FITC滤光片(Ex / Em = 490 / 525nm)的荧光显微镜成像。Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒是美国AAT Bioquest研发的产品。
适用仪器
荧光显微镜 | |
Ex: | FITC 滤波片组 |
Em: | FITC 滤波片组 |
推荐孔板: | 黑色透明底板 |
样品分析
概述
准备样品(微孔板孔)从板上取下液体
加入100μL/孔的iFluor 488-鬼笔环肽溶液
在室温下染色细胞15到60分钟洗涤细胞
在Ex / Em = 488 / 520nm下在显微镜下检查样品
注意:打开前将所有组件加热至室温。
操作步骤
1.准备1X iFluor 488-鬼笔环肽工作溶液:
将10μL的iFluor 488-鬼笔环肽(组分A)加入10mL标记缓冲液(组分B)中。
注意1:未使用的1X iFluor 488-鬼笔环肽原液应等分并保存在-20 ℃。避光。
注意2:不同的细胞类型可能染色不同。 应相应地制备iFluor 488-鬼笔环肽工作溶液的浓度。
2.染色细胞:
2.1执行甲醛固定。 在室温下用3.0-4.0%甲醛的PBS孵育细胞10-30分钟。
注意:避免使用任何含甲醇的固定剂,因为甲醇会在固定过程中破坏肌动蛋白。 优选的固定剂是不含甲醇的甲醛。
2.2用PBS冲洗固定的细胞2-3次。
2.3可选:在PBS中加入0.1%Triton X-100固定细胞(步骤2.2)3至5分钟,以增加渗透性。 用PBS冲洗细胞2-3次。
2.4将100μL/孔(96孔板)的iFluor 488-鬼笔环肽工作溶液(来自步骤1)加入固定的细胞(来自步骤2.2或2.3),并在室温下将细胞染色15至60分钟。
2.5用PBS轻轻冲洗细胞2至3次以去除多余的染料,然后使用FITC通道进行板密封和成像。
试剂应用文献
Authors: Yutong He, Genlan Ye, Chen Song, Chuangkun Li, Weirong Xiong, Lei Yu, Xiaozhong Qiu, Leyu Wang
Journal: Theranostics. 2018; 8(18): 5159–5177.
参考文献
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