钙黄绿素, AM CAS 148504-34-1*超纯级*
Ex (nm) | 501 | Em (nm) | 521 |
分子量 | 994.86 | 溶剂 | DMSO |
存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
钙黄绿素, AM是美国AAT Bioquest生产的用于细胞活力测定的试剂,Calcein AM是一种疏水性化合物,很容易渗透完整的活细胞。 它广泛用于细胞活力测定。 通过细胞内酯酶水解非荧光钙黄绿素AM产生强荧光的亲水钙黄绿素,其在细胞质中良好保留。 酯酶活性与小瓶细胞的数量成比例,因此与由钙黄绿素AM的酯酶催化水解产生的钙黄绿素的荧光强度直接相关。 Calcein AM是用于标记和监测活细胞细胞功能的流行的荧光探针之一。 然而,Calcein AM的单色使得在多色应用中不可能使用这种有价值的试剂。 例如,由于Calcein AM具有与GFP相同的颜色,因此不可能将Calcein AM与GFP转染的细胞组合使用。百萤生物是AAT Bioquest 的中国代理商,为您提供优质的钙黄绿素。
选择指南
Dye | Calcein Blue | CytoCalcein™ Violet 450 | Calcein UltraBlue™ | CytoCalcein™ Violet 500 | Calcein UltraGreen™ | Calcein | Calcein Orange™ | Calcein Red™ | Calcein Deep Red™ | |
原理 | 在活细胞中,非荧光钙黄绿素 AM 在细胞内酯酶的作用下 AM 酯水解后转化为荧光钙黄绿素产物。 | |||||||||
荧光效果 | 活细胞具有高度荧光,很容易与无荧光的死细胞区分开。 | |||||||||
Laser(nm) | UV (350) | Violet (405) | UV (350) | Violet (405) | Blue (488) | Blue (488) | Green (532) | Yellow (561-568) | Red (633-647) | |
Ex/Em(nm) | 354/441 | 406/445 | 359/458 | 420/505 | 492/514 | 501/521 | 531/545 | 562/576 | 643/663 | |
是否复用 | 是 | 是 | 是 | 是 | 是 | 是 | 是 | 是 | 是 | |
染料相容性 | 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 | 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 | 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 | 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 | 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 | 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 | 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 | 与蓝色和绿色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 | 与蓝色和绿色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 | |
样品类型 | 活细胞 | |||||||||
适用仪器 | 荧光显微镜、荧光酶标仪、流式细胞仪 | |||||||||
货号 | 22007 | 22012 | 21908 | 22013 | 21905 | 22003 | 22009 | 21900 | 22011 | |
适用仪器
流式细胞仪 | |
Ex: | 488 nm |
Em: | 530/30 nm |
通道: | FITC通道 |
荧光显微镜 |
|
Ex: | FITC 滤波片组 |
Em: | FITC 滤波片组 |
推荐孔板: | 黑色透明底板 |
荧光酶标仪 |
|
Ex: | 490 nm |
Em: | 525 nm |
Cutoff: | 515 nm |
推荐孔板: | 黑色透明底板 |
读取模式: | 底读模式 |
使用细胞活力指标AM酯类
AM酯是非极性酯,其易于穿过活细胞膜,并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。 AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针加载到活细胞中。 但是,使用AM酯时必须小心,因为它们易于水解,特别是在溶液中。 它们应在使用前重新配制成高质量的无水二甲基亚砜(DMSO)。DMSO储备溶液可以在20℃下干燥储存并避光。 在这些条件下,AM酯应稳定数月。
以下是我们推荐的将AM酯加载到活细胞中的方案。 该说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。
a)在高质量无水DMSO中制备2至5mM AM酯的储备溶液。非离子洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加AM酯的水溶性。
注意:在稀释到上样缓冲液中之前,可将等体积的20%Pluronic®F-127溶液添加到细胞活力指示剂的DMSO储备溶液中。终的Pluronic®F-127浓度约为0.02%。
注意:不建议在Pluronic®F-127存在下长期储存AM酯。
b)在实验当天,要么将细胞活力的固体指示剂溶解在DMSO中,要么将等分的指示剂储备溶液解冻至室温。在您选择的缓冲液(如Hanks和Hepes缓冲液)中制备1至10μM的工作溶液。对于大多数细胞系,建议终浓度范围为4至5μM的细胞活力指标。细胞加载所需指标的确切浓度必须根据经验确定。
c)如果您的细胞含有有机阴离子转运蛋白,可以在细胞培养基中加入丙磺舒(1-2.5 mM)或磺吡酮(0.1-0.25 mM),以减少脱酯化指标的泄漏。在室温或37℃下将细胞与AM酯孵育20分钟至1小时。
d)在不含细胞活力指示剂的缓冲液(含有阴离子转运蛋白抑制剂,如果适用)中洗涤细胞以除去过量的探针。
注意:通过流式细胞术立即分析细胞样品,以确定在零时间没有洗涤的每个细胞的平均荧光。
e)在所需的Ex / Em波长下进行实验 。
参考文献
Bi-layered α-tocopherol acetate loaded membranes for potential wound healing and skin regeneration
Authors: Saba Zahid, Hamad Khalid, Fakhera Ikram, Haffsah Iqbal, Muhammad Samie, Lubna Shahzadi, Asma Tufail Shah, Muhammad Yar, Aqif Anwar Chaudhry, Sana Javaid Awan
Journal: Materials Science and Engineering: C (2019)
Reactive oxygen species and transient receptor potential cation channel vanilloid 1 (TRPV1) as mediators of Wallerian degeneration
Authors: Bradley James Kievit
Journal: (2019)
TAK1 regulates endothelial cell necroptosis and tumor metastasis
Authors: Lida Yang, Sayali Joseph, Tianliang Sun, Julia Hoffmann, Sophia Thevissen, Stefan Offermanns, Boris Strilic
Journal: Cell Death & Differentiation (2019): 1
Targeting Immune-Related Molecules in Cancer Therapy: A Comprehensive In Vitro Analysis on Patient-Derived Tumor Models
Authors: Claudia Maletzki, Philine Scheinpflug, Anika Witt, Ernst Klar, Michael Linnebacher
Journal: BioMed Research International (2019)
The Fibroblast TIAM2 Promotes Lung Cancer Cell Invasion and Metastasis
Authors: Shuoke Li, Yangwei Ou, Shaobo Liu, Jiye Yin, Wei Zhuo, Masha Huang, Tao Zhu, Wei Zhang, Honghao Zhou, Zhaoqian Liu
Journal: Journal of Cancer (2019): 1879--1889
Functional imaging of neuronal activity of auditory cortex by using Cal-520 in anesthetized and awake mice
Authors: Jingcheng Li, Jianxiong Zhang, Meng Wang, Junxia Pan, Xiaowei Chen, Xiang Liao
Journal: Biomedical Optics Express (2017): 2599--2610
NINJ2--A novel regulator of endothelial inflammation and activation
Authors: Jingjing Wang, Jingjing Fa, Pengyun Wang, Xinzhen Jia, Huixin Peng, Jing Chen, Yifan Wang, Chenhui Wang, Qiuyun Chen, Xin Tu
Journal: Cellular Signalling (2017)
Erythropoietin Stimulates Endothelial Progenitor Cells to Induce Endothelialization in an Aneurysm Neck After Coil Embolization by Modulating Vascular Endothelial Growth Factor
Authors: Peixi Liu, Yingjie Zhou, Qingzhu An, Yaying Song, Xi Chen, Guo-Yuan Yang, Wei Zhu
Journal: MEDICINE (2016): 1--8
Flexible Endoscopic Spray Application of Respiratory Epithelial Cells as Platform Technology to Apply Cells in Tubular Organs
Authors: Anja Lena Thiebes, Manuel Armin Reddemann, Johannes Palmer, Reinhold Kneer, Stefan Jockenhoevel, Christian Gabriel Cornelissen
Journal: Tissue Engineering Part C: Methods (2016): 322--331
Influence of hypothermia and subsequent rewarming upon leukocyte-endothelial interactions and expression of Junctional-Adhesion-Molecules A and B
Authors: Nicolai V Bogert, Isabella Werner, Angela Kornberger, Patrick Meybohm, Anton Moritz, Till Keller, Ulrich A Stock, Andres Beiras-Fernandez
Journal: Scientific reports (2016)
相关产品
产品名称 | 货号 |
钙黄绿素绿,AM | Cat#21905 |
钙黄绿素, AM | Cat#22002 |
钙黄绿素红,AM | Cat#21900 |