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钙黄绿素红,AM

英文名称:Calcein Red™ AM
产品参数
Ex (nm)562Em (nm)576
分子量1015.79溶剂DMSO
存储条件在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

钙黄绿素红,AM是美国AAT Bioquest生产的用于检测活细胞的荧光探针,Calcein AM是用于标记和检测活细胞细胞功能的流行的荧光探针之一。然而,Calcein AM的单色使得在多色应用中不可能使用这种有价值的试剂。例如,由于与GFP相同的颜色,不可能将Calcein AM与GFP-转化细胞组合使用。为了解决Calcein AM的这种颜色限制,我们开发了Calcein Orange ,Calcein Red 和Calcein Deep Red 。这些新的Calcein AM类似物与Calcein AM结合使用,可以对活细胞进行多色标记和功能分析。非荧光Calcein Red AM可以轻松进入活细胞并水解产生强荧光Calcein Red 染料。可以使用常见的TRITC / Cy3滤波片组检测Calcein Red 染料。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的钙黄绿素红,AM。 

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选择指南

Dye Calcein Blue CytoCalcein™ Violet 450 Calcein UltraBlue™ CytoCalcein™ Violet 500 Calcein UltraGreen™ Calcein Calcein Orange™ Calcein Red™ Calcein Deep Red™
原理 在活细胞中,非荧光钙黄绿素 AM 在细胞内酯酶的作用下 AM 酯水解后转化为荧光钙黄绿素产物。
荧光效果 活细胞具有高度荧光,很容易与无荧光的死细胞区分开。
Laser(nm) UV (350) Violet (405) UV (350) Violet (405) Blue (488) Blue (488) Green (532) Yellow (561-568) Red (633-647)
Ex/Em(nm) 354/441 406/445 359/458 420/505 492/514 501/521 531/545 562/576 643/663
是否复用
染料相容性 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和绿色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和绿色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容
样品类型 活细胞
适用仪器 荧光显微镜、荧光酶标仪、流式细胞仪
货号   22007 22012 21908 22013 21905 22003 22009 21900 22011

 

适用仪器


流式细胞仪  
Ex: 532/561 nm
Em: 585/40   nm 

 


荧光显微镜

Ex: TRITC 滤波片组
Em: TRITC 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板

 


荧光酶标仪

 
Ex: 540 nm
Em: 590 nm
Cutoff: 570 nm
推荐孔板: 黑色透明底板
读取模式: 底读模式
实验方案

操作步骤

1.准备HHBS缓冲液,10%Pluronic®F-127溶液和25 mM Probenecid溶液。

2.在高质量无水DMSO中制备2 mM至5 mM Calcein Red AM原液。
2.1使用Calcein Red AM的量:1毫克
2.2所需浓度:2 mM
2.3在合适的容器中,将1mg Calcein Red TM AM与492.23μL无水DMSO混合。
 

3.使用10μMCalceinRed AM 4在HHBS中制备2X工作溶液,0.08%Pluronic®F-127和2 mM丙磺舒。
3.1终孔内浓度的Calcein Red AM:5μM
3.2Pluronic®F-127的终井内浓度:0.04%
3.3终孔内浓度的丙磺舒:1mM
3.4在合适的容器中,混合16μL的Calcein Red AM,25.6μL的10%Pluronic F-127和256μL的25mM丙磺舒。然后,添加HHBS或您选择的缓冲液,直到体积为3.2 mL。
注意:对于大多数细胞系,我们建议Calcein Red AM的终浓度为4至5μM。
注意:推荐的Pluronic F-127孔浓度终为0.02%至0.04%。
注意:推荐的终浓度为1至2.5 mM的Probenecid。
 

4.将100μL染料工作溶液加入已经含有100μL培养基的所需孔中。
4.1该步骤将染料工作溶液从2X稀释至1X,并将每种组分的终浓度调节至以下:5μM的Calcein Red AM,0.04%Pluronic F-127,1mM丙磺舒。
 

5.孵育染料
5.1将染料加载板在细胞培养箱中孵育20-60分钟。
5.2将染料加载板在室温下孵育30分钟。
 

6.用1.0 mM Probenecid准备HHBS缓冲液(或您选择的缓冲液)。
6.1在合适的容器中加入160μL的25mM丙磺舒。然后,添加HHBS或您选择的缓冲液,直到体积为4 mL。

 

7.用HHBS缓冲液或您选择的缓冲液替换染料工作溶液,使用1.0 mM Probenecid。
7.1首先,从所需孔中除去200μL染料工作溶液和培养基。
7.2在相同的孔中加入200μL含有1.0mM丙磺舒的HHBS(或您选择的缓冲液)。
 

8.运行实验
8.1为您的样品添加所需的处理。
8.2以Ex / Em = 560/574 nm运行实验。

 

参考文献

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Authors: Nienke R Wevers, Dhanesh G Kasi, Taylor Gray, Karlijn J Wilschut, Benjamin Smith, Remko van Vught, Fumitaka Shimizu, Yasuteru Sano, Takashi Kanda, Graham Marsh
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Astragaloside IV protects blood-brain barrier integrity from LPS-induced disruption via activating Nrf2 antioxidant signaling pathway in mice
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Journal: Toxicology and applied pharmacology (2017)

Functional imaging of neuronal activity of auditory cortex by using Cal-520 in anesthetized and awake mice
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Erythropoietin Stimulates Endothelial Progenitor Cells to Induce Endothelialization in an Aneurysm Neck After Coil Embolization by Modulating Vascular Endothelial Growth Factor
Authors: Peixi Liu, Yingjie Zhou, Qingzhu An, Yaying Song, Xi Chen, Guo-Yuan Yang, Wei Zhu
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Flexible Endoscopic Spray Application of Respiratory Epithelial Cells as Platform Technology to Apply Cells in Tubular Organs
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Journal: Tissue Engineering Part C: Methods (2016): 322--331

Influence of hypothermia and subsequent rewarming upon leukocyte-endothelial interactions and expression of Junctional-Adhesion-Molecules A and B
Authors: Nicolai V Bogert, Isabella Werner, Angela Kornberger, Patrick Meybohm, Anton Moritz, Till Keller, Ulrich A Stock, Andres Beiras-Fernandez
Journal: Scientific reports (2016)

Inhibition of ABC transport proteins by oil sands process affected water
Authors: Hattan A Alharbi, David MV Saunders, Ahmed Al-Mousa, Jane Alcorn, Alberto S Pereira, Jonathan W Martin, John P Giesy, Steve B Wiseman
Journal: Aquatic Toxicology (2016): 81--88

Rapid generation of collagen-based microtissues to study cell--matrix interactions
Authors: Marie-Elena Brett, Alexandra L Crampton, David K Wood
Journal: Technology (2016): 1--8

Toxicokinetics and toxicodynamics of chlorpyrifos is altered in embryos of Japanese medaka exposed to oil sands process-affected water: evidence for inhibition of P-glycoprotein
Authors: Hattan A Alharbi, Jane Alcorn, Ahmed Al-Mousa, John P Giesy, Steve B Wiseman
Journal: Journal of Applied Toxicology (2016)

 

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