ReadiLink™xtra Rapid iFluor™488抗体标记试剂盒（标记50ug抗体）*兼容BSA*
| Ex (nm) | 491 | Em (nm) | 516 |
| 分子量 | N/A | 溶剂 | - |
| 存储条件 | - |
产品货期
咨询
产品优势
1.可完成2×50 μg抗体的高效标记
2.兼容单克隆及多克隆抗体的快速标记
3.采用两步混合标记技术，无需离心柱纯化步骤即可完成抗体标记
适用范围
主要用于标记抗体
产品介绍
ReadiLink™ xtra 快速抗体标记试剂盒 仅需 2 步简单混合操作，无需柱纯化。本试剂盒配备的预活化iFluor®488染料具有好的稳定性，能高效特异性地与抗体结合，每个试剂盒可完成2次50μg抗体的标记（共2×50μg），每管染料均经过优化，专用于50μg抗体的高效标记。适用于流式细胞术、免疫荧光（IF）、免疫组化（IHC）、蛋白质印迹（WB）、 酶联免疫吸附测定（ELISA）等应用。
本试剂盒为单克隆/多克隆抗体标记亮绿色荧光iFluor® 488染料提供便捷可靠的方法。AAT Bioquest专有的iFluor®染料经特殊优化，特别适用于蛋白质（尤其是抗体）标记。该系列染料具有亮度高、光稳定性强、对蛋白荧光淬灭效应极低等优势，可被主流荧光仪器的激光线（如350 nm、405 nm、488 nm、555 nm和633 nm）有效激发。
图1. ReadiLink™xtra快速抗体标记流程示意图。该技术仅需两个简易步骤，且无需纯化操作，即可在一小时内完成微克级抗体的共价标记
实验前重要提示：
请将所有组分恢复至室温后短暂离心，开盖前确保管壁附着物完全沉降；所有工作液需现用现配，配制完成后请立即开始偶联反应。本操作方案为推荐流程，实际实验条件可根据具体研究需求进行优化调整
标准操作规程（标记50μg蛋白质）
将所有组分加热并在打开前将样品瓶短暂离心，并在开始结合前准备所需的溶液。
1.准备蛋白质溶液（溶液A）：
1.1 标记50µg蛋白质（假设目标蛋白质浓度为1mg / mL）， 取50 µL目标蛋白溶液，加入5 µL反应缓冲液（组分B，占总体积10%）
注：如果您的蛋白质浓度不同，请相应调整蛋白质体积，使~50μg蛋白质可用于标记反应。
1.2 标记100µg蛋白质（假设目标蛋白质浓度为1mg / mL），取100 µL目标蛋白溶液，加入10 µL反应缓冲液（组分B，占总体积10%）
注：推荐使用pH 7.2-7.4的1X PBS缓冲液;
若蛋白溶解于甘氨酸缓冲液，需先透析至PBS或使用Millipore UFC501008超滤管（10 kDa截留分子量）去除游离氨基/铵盐（如硫酸铵、乙酸铵等）
注：含有0.1%至0.5%牛血清白蛋白(BSA)作为稳定剂的不纯抗体或抗体仍可获得良好的标记效果。
注：建议最终蛋白质浓度范围为1-2 mg / mL； 当浓度<1 mg/mL时偶联效率将显著下降。
2.偶联反应：
2.1 将蛋白质溶液（溶液A）加入到一瓶标记染料（组分A）中，通过反复移液几次将其混合均匀，或将小瓶涡旋几秒钟。
注： 若标记100 µg蛋白，需将蛋白样本均分为两份（各50 µg），分别与两管标记染料反应后合并。
2.2 将缀合反应混合物在室温下保持30-60分钟。
注：如果需要，可以旋转或摇动缀合反应混合物更长的时间。
3.终止偶联反应：
3.1 50 µg蛋白标记，加入5 µL TQ染料淬灭缓冲液（组分C）；
100 µg蛋白标记，加入10 µL TQ染料淬灭缓冲液（组分C）；
加入的缓冲液是总反应体积的10％。
3.2 混匀后室温静置10分钟，标记蛋白即可使用
4.蛋白偶联物的储存条件
蛋白质缀合物应在载体蛋白（例如0.1％牛血清白蛋白）存在下以> 0.5 mg / mL的浓度存储。为了更长的存储时间，可以将蛋白质结合物冻干或分成单份使用，并存储在≤–20°C下。
