Helixyte Green 双链DNA荧光定量试剂盒

Helixyte Green 双链DNA荧光定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于DNA定量的试剂盒，Helixyte 绿色dsDNA定量测定试剂盒可用于在ssDNA，RNA和游离核苷酸存在的情况下选择性地检测低至25 pg / ml的dsDNA。 Helixyte Green与dsDNA结合后显示出较大的荧光增强。 该测定法在三个数量级上是线性的，并且几乎没有序列依赖性，使您能够准确地测量来自多种来源的DNA，包括基因组DNA，病毒DNA，微量制备DNA或PCR扩增产物。 Helixyte 绿色dsDNA定量分析试剂盒比紫外吸收读数的灵敏度高几个数量级。 在等摩尔量的RNA存在下，它对dsDNA具有特异性。 该套件具有混合和读取格式的强大功能。 它可以与台式荧光计或手持式荧光计（例如Qubit荧光计）一起使用。 该试剂盒是Quant-iT PicoGreen®dsDNA分析试剂盒（Quant-iT 和PicoGreen®是Invitrogen的商标）的替代品。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Helixyte Green 双链DNA荧光定量试剂盒。

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样品实验方案

简要概述

向每个比色皿中添加1mL dsDNA标准液或测试样品
加入1mL Helixyte Green 工作溶液
在室温下孵育5-10分钟
监测Ex / Em = 490/525 nm处的荧光

 

溶液配制

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1分析缓冲液（1X）
用无菌，蒸馏，无DNase的水将浓缩的缓冲液稀释20倍，从而制备1X检测缓冲液。

2.标准溶液

dsDNA标准
对于高范围标准曲线：
将30 µL 100 µg / mL dsDNA储备溶液（组分C）添加到1.47 mL的1X分析缓冲液中以得到2000 ng / mL dsDNA溶液，然后进行1：2和1:10连续稀释以获得1000、100、10 ，1和0 ng / mL。

对于低范围标准曲线：
将40 µL 2 µg / mL dsDNA储备液添加到1.56 mL 1X分析缓冲液中，以得到50 ng / mL dsDNA溶液，然后以1：2和1:10连续稀释以获得25、2.5、0.25、0.025和0 ng / mL。

3.工作溶液

通过在1X分析缓冲液中将浓缩的DMSO溶液稀释200倍来制备Helixyte Green 工作溶液。 例如，要准备足够的工作溶液以测定2 mL终体积中的10个样品，请将50μLHelixyte Green （组分A）添加到10 mL分析缓冲液（组分B）中。 通过用箔纸覆盖或将其置于黑暗中来保护工作溶液免受光照。 注意：我们建议在塑料容器中而不是玻璃中制备此溶液，因为染料可能会吸附到玻璃表面。 为了获得佳结果，该溶液应在准备后的几个小时内使用。

 

样品示例及操作

1.向每个装有1 mL dsDNA标准品，空白对照和测试样品的比色皿中加入1 mL Helixyte Green 工作溶液，以使dsDNA测定总体积为2 mL /比色皿。

2.在避光条件下，于室温下孵育反应5至10分钟。

3.使用分光光度计在Ex / Em = 490/525 nm处监视荧光的增加。 注意：为使光漂白效应小化，请对所有样品保持恒定的荧光测量时间。

 

参考文献

Inhibitors of Streptococcus pneumoniae surface endonuclease EndA discovered by high-throughput screening using a PicoGreen fluorescence assay
Authors: Peterson EJ, Kireev D, Moon AF, Midon M, Janzen WP, Pingoud A, Pedersen LC, Singleton SF.
Journal: J Biomol Screen (2013): 247

Validation of a PicoGreen-based DNA quantification integrated in an RNA extraction method for two-dimensional and three-dimensional cell cultures
Authors: Chen Y, Sonnaert M, Roberts SJ, Luyten FP, Schrooten J.
Journal: Tissue Eng Part C Methods (2012): 444

Characterization of PicoGreen interaction with dsDNA and the origin of its fluorescence enhancement upon binding
Authors: Dragan AI, Casas-Finet JR, Bishop ES, Strouse RJ, Schenerman MA, Geddes CD.
Journal: Biophys J (2010): 3010

Comparison of SYBR Green I-, PicoGreen-, and [3H]-hypoxanthine-based assays for in vitro antimalarial screening of plants from Nigerian ethnomedicine
Authors: Abiodun OO, Gbotosho GO, Ajaiyeoba EO, Happi CT, Hofer S, Wittlin S, Sowunmi A, Brun R, Oduola AM.
Journal: Parasitol Res (2010): 933

Metal-enhanced PicoGreen fluorescence: application to fast and ultra-sensitive pg/ml DNA quantitation
Authors: Dragan AI, Bishop ES, Casas-Finet JR, Strouse RJ, Schenerman MA, Geddes CD.
Journal: J Immunol Methods (2010): 95

Quantification of dsDNA using the Hitachi F-7000 Fluorescence Spectrophotometer and PicoGreen dye
Authors: Moreno LA, Cox KL.
Journal: J Vis Exp. (2010)

Development and characterization of a novel host cell DNA assay using ultra-sensitive fluorescent nucleic acid stain "PicoGreen"
Authors: Ikeda Y, Iwakiri S, Yoshimori T.
Journal: J Pharm Biomed Anal (2009): 997

Enhanced DNA dynamics due to cationic reagents, topological states of dsDNA and high mobility group box 1 as probed by PicoGreen
Authors: Noothi SK, Kombrabail M, Kundu TK, Krishnamoorthy G, Rao BJ.
Journal: FEBS J (2009): 541

Factors affecting quantification of total DNA by UV spectroscopy and PicoGreen fluorescence
Authors: Holden MJ, Haynes RJ, Rabb SA, Satija N, Yang K, Blasic JR, Jr.
Journal: J Agric Food Chem (2009): 7221

Label-free DNA sequence detection with enhanced sensitivity and selectivity using cationic conjugated polymers and PicoGreen
Authors: Ren X, Xu QH.
Journal: Langmuir (2009): 43

 

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产品名称	货号
Helixyte Green 双链DNA荧光定量试剂盒 适合酶标仪检测检测	Cat#17650