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Helixyte Green 双链DNA荧光定量试剂盒 适合酶标仪检测

英文名称:Helixyte™ Green Fluorimetric dsDNA Quantitation Kit *Optimized for Microplate Readers*
产品参数
Ex (nm)502Em (nm)522
分子量-溶剂-
存储条件-
产品概述

Helixyte Green 双链DNA荧光定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于DNA定量的试剂盒,Helixyte 绿色dsDNA定量测定试剂盒可用于在ssDNA,RNA和游离核苷酸存在的情况下选择性地检测低至25 pg / ml的dsDNA。Helixyte Green与dsDNA结合后显示出较大的荧光增强。 该测定法在三个数量级上是线性的,并且几乎没有序列依赖性,使您能够准确地测量来自多种来源的DNA,包括基因组DNA,病毒DNA,微量制备DNA或PCR扩增产物。 Helixyte 绿色dsDNA定量分析试剂盒比紫外吸收读数的灵敏度高几个数量级。 在等摩尔量的RNA存在下,它对dsDNA具有特异性。 该试剂盒具有强大的混合和读取格式,可与基于96和384孔荧光板的酶标仪兼容。它也可以与台式荧光计或手持式荧光计(例如Qubit荧光计)一起使用。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Helixyte Green 双链DNA荧光定量试剂盒。 

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实验方案

样品实验方案

简要概述

加入100 µL dsDNA标准液或测试样品
加入100 µL Helixyte Green 工作溶液
在室温下孵育5-10分钟
监测Ex / Em = 490/525 nm处的荧光

 

溶液配制

1.标准溶液

dsDNA标准

将10 µL 100 µg / mL dsDNA储备溶液(组分C)添加到190 µL测定缓冲液(组分B)中,得到5 µg / mL dsDNA溶液,然后进行1:3连续稀释以获得dsDNA连续稀释标准液(DS7) -DS1)。

2.工作溶液

通过将50μLHelixyte Green (组分A)添加到10 mL的测定缓冲液(组分B)中,制备Helixyte Green 工作溶液。 通过用箔纸覆盖或将其置于黑暗中来保护工作溶液免受光照。 注意:我们建议在塑料容器中而不是玻璃中制备此溶液,因为染料可能会吸附到玻璃表面。 为了获得佳结果,该溶液应在准备后的几个小时内使用。

 

样品示例及操作

表1.固体黑色96孔微孔板中dsDNA标准品和测试样品的布局。 DS = dsDNA标准品(DS1-DS7,2.3至1667 ng / mL); BL =空白控制; TS =测试样品。

BL BL TS TS
DS1 DS1 ... ...
DS2 DS2 ... ...
DS3 DS3    
DS4 DS4    
DS5 DS5    
DS6 DS6    
DS7 DS7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
DS1-DS7 100ul 系列稀释液(2.3至1667 ng / mL)
BL 100ul TE
TS 100ul 测试样品

1.根据表1和2中提供的布局,准备dsDNA标准品(DS),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25 µL试剂代替100 µL。

2.将100 µL Helixyte Green 工作溶液添加到dsDNA标准品,空白对照和测试样品的每个孔中,使dsDNA测定总体积为200 µL /孔。 对于384孔板,将25 µL的BLANK分析混合物加到每个孔中,总体积为50 µL /孔。

3.在避光条件下,于室温下孵育反应5至10分钟。

4.使用荧光酶标仪在Ex / Em = 490/525 nm(cut off:515 nm)处检测荧光的增加。

 

参考文献

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产品名称 货号
Helixyte Green 双链DNA荧光定量试剂盒 Cat#17651