胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物 Z-IETD-ProRed 620 红
| Ex (nm) | 532 | Em (nm) | 619 |
| 分子量 | 1565.59 | 溶剂 | DMSO |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物 Z-IETD-ProRed 620 红是美国AAT Bioquest生产的荧光底物，ProRed 蛋白酶底物无色，无荧光。ProRed 阻断蛋白酶裂解肽基被半胱氨酸蛋白酶产生强烈的红色荧光，可以在〜620 nm处的〜530 nm激发波长被监控到。 ProRed 衍生的胱天蛋白酶底物是敏感的红色指示剂，用于荧光及各种蛋白酶活性检测。IETD-ProRed 酶底物主要用于检测蛋白酶8。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物 Z-IETD-ProRed 620 红。
样品实验方案
以下说明书仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。
1.使用AMC，AFC，pNA，R110和ProRed底物的一般溶液Caspase测定
1.1在DMSO中制备10mM储备溶液。
1.2制备2X半胱天冬酶底物（50μM）测定溶液，如下所示：
50uL原液
100uL DTT（1M）
400uL EDTA（100 mM）
10mL Tris缓冲液（20mM），pH = 7.4
1.3将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液（来自步骤1.2）混合，并在室温下孵育溶液至少1小时。
1.4使用荧光酶标仪检测荧光，或使用吸光度酶标仪检测吸光度。
2.细胞Caspase检测使用细胞渗透FMK半胱天冬酶探针
2.1在DMSO中制备2-5mM储备溶液。
2.2根据需要对细胞进行处理。
2.3通过用20mM Hepes缓冲液（HHBS）稀释Hanks中的DMSO储备溶液（来自步骤2.1），制备2X可渗透的半胱天冬酶底物（20μM）测定溶液。
2.4用2X半胱天冬酶底物测定溶液（来自步骤2.3）混合等体积的处理细胞，并将细胞在37℃，5％CO 2培养箱中孵育至少1小时。
2.5用HHBS洗涤细胞至少一次。
2.6用流式细胞仪，荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。
3.细胞Caspase检测使用细胞渗透性FMK Caspase探针（仅适用于＃13470-13476）
3.1通过向小瓶中加入50μLDMSO制备250X储备溶液。
3.2根据需要对细胞进行处理。
3.3将250 X DMSO储备溶液（来自步骤3.1）以1：250的比例（例如2 uL至500 uL细胞）添加到细胞溶液中，并将细胞在37°C，5％CO 2培养箱中孵育1 小时。
3.4用HHBS洗涤细胞至少一次。
3.5用流式细胞仪，荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。
参考文献
Degenerin channel activation causes caspase-mediated protein degradation and mitochondrial dysfunction in adult C. elegans muscle
Authors: Christopher J Gaffney, Freya Shephard, Jeff Chu, David L Baillie, Ann Rose, Dumitru Constantin-Teodosiu, Paul L Greenhaff, Nathaniel J Szewczyk
Journal: Journal of Cachexia, Sarcopenia and Muscle (2015)
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