胱天蛋白酶Caspase 8荧光底物Ac-IETD-AFC 绿 CAS 211990-57-7
| Ex (nm) | 376 | Em (nm) | 482 |
| 分子量 | 729.65 | 溶剂 | DMSO |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
胱天蛋白酶Caspase 8荧光底物Ac-IETD-AFC 绿是美国AAT Bioquest生产的荧光底物，Ac-IETD-AFC是含有乙酰基（Ac）部分的荧光半胱天冬酶-8 /颗粒酶B底物。 该底物被半胱天冬酶8水解，产生高度荧光的7-酰氨基-4-三氟甲基香豆素（AFC）。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的胱天蛋白酶Caspase 8荧光底物Ac-IETD-AFC 绿。
操作方法
以下协议仅提供指导，应根据您的特定需求进行修改。
使用AMC，AFC，pNA，R110和ProRed底物的常规解决方案胱天蛋白酶测定
1.在DMSO中准备10 mM的储备溶液。
2.如下准备2X半胱天冬酶底物（50 µM）分析溶液：50 µL底物原液，100 µL DTT（1M），400 µL EDTA（100 mM），10 mL Tris Buffer（20 mM），pH = 7.4。
3.将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合，并在室温下孵育至少1小时。
4.使用荧光酶标仪监测荧光，或使用酶标仪监测吸光度。
使用细胞渗透性FMK Caspase探针的细胞Caspase测定
1.在DMSO中准备2-5 mM的储备溶液。
2.根据需要处理细胞。
3.通过用20 mM Hepes缓冲液（HHBS）在Hanks中稀释DMSO储备溶液（来自步骤2.1），制备2X渗透性半胱天冬酶底物（20 µM）分析溶液。
4.将等体积的处理过的细胞与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合（来自步骤2.3），并在37°C，5％CO2的培养箱中孵育细胞至少1小时。
5.用HHBS清洗细胞至少一次。
6.通过流式细胞仪，荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。
使用细胞渗透性FMK Caspase探针进行细胞半胱天冬酶测定（仅适用于＃13470-13476）
1.通过向小瓶中加入50 µL DMSO制备250X储备液。
2.根据需要处理细胞。
3.以1：250的比例将250 X DMSO储备溶液添加到细胞溶液中（例如2 µL至500 µL细胞），并将细胞在37°C，5％CO2的培养箱中孵育1小时。
4.用HHBS清洗细胞至少一次。
5.通过流式细胞仪，荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。
参考文献
pH-Assisted surface functionalization of selenium nanoparticles with curcumin to achieve enhanced cancer chemopreventive activity
Authors: Shaoxuan Yu, Yanru Wang, Wentao Zhang, Yuhuan Zhang, Wenxin Zhu, Yingnan Liu, Daohong Zhang, Jianlong Wang
Journal: RSC Advances (2016): 72213--72223
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