活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 蓝色荧光
Ex (nm) | - | Em (nm) | - |
分子量 | - | 溶剂 | - |
存储条件 | - |
Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测过氧化物的试剂盒,过氧化氢是一种活性氧代谢副产物,可作为许多氧化应激相关状态的关键调节剂。 它涉及许多,动脉粥样硬化,糖尿病血管病变,骨质疏松症,许多神经退行性疾病和唐氏综合症有关的生物学事件。 这种活性物质的测量有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。 Cell Meter 细胞内荧光过氧化氢检测试剂盒使用我们独特的OxiVision Blue过氧化物探针来定量活细胞中的过氧化氢。 OxiVision 蓝色过氧化物探针具有细胞渗透性,当与过氧化氢反应时会产生蓝色荧光。 该试剂盒提供了一种监测活细胞中过氧化氢水平的灵敏工具,并且它被优化用于荧光显微镜。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒。
活性氧(ROS)篇:包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全
适用仪器
荧光显微镜 | |
Ex: | DAPI 滤波片 |
Em: | DAPI 滤波片 |
推荐孔板: | 黑色透明底板 |
样品实验方案
简要概述
1.在生长培养基中制备细胞
2.用OxiVision 蓝色过氧化物传感器染色细胞
3.用测试化合物处理细胞
4.用DAPI滤光片或Ex / Em = 405 / 450nm监测荧光强度
溶液制备
1.储备溶液
所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. OxiVision 蓝色过氧化物原液(500X):
将40μLDMSO(组分C)加入到OxiVision 蓝色过氧化物(组分A)的小瓶中并充分混合以制备500X OxiVision 蓝色过氧化物传感器储备溶液。 注意:20μL重组的OxiVision 蓝色过氧化物传感器储备溶液足以用于1个平板。 应立即使用原液。 避光。
2.工作溶液
将10μL500XOxiVision 蓝色过氧化物储备溶液加入500μL分析缓冲液(组分B)中,充分混合,制成OxiVision 蓝色过氧化物工作溶液。 注意:此OxiVision 蓝色过氧化物工作溶液不稳定; 使用前根据需要准备。
样品分析
1.添加10μL/孔(96孔板)或2.5μL/孔(384孔板)的OxiVision 蓝色过氧化物工作溶液,每孔90μL细胞培养物,96孔板或22.5μL细胞培养物在384孔细胞板中。注意:染色前无需清洗细胞。建议在完全培养基中染色细胞。
2.用测试化合物在完全培养基或37℃的所需缓冲液中处理细胞一段所需的时间。对于对照样品(未处理的细胞),加入相应量的化合物缓冲液。注意:建议在完全培养基中处理细胞。然而,如果测试的化合物对血清敏感,则可以在前吸出生长培养基和血清因子。抽吸后,将1X Hank盐溶液和20 mM Hepes缓冲液(HHBS)或您选择的缓冲液加入细胞中。或者,可以在无血清培养基中处理细胞。我们用完全培养基中的100μM过氧化氢在37℃处理Jurkat细胞90分钟以诱导过氧化氢。详细信息请参见图1。
3.用DPBS洗涤细胞1-2次,并用100uL /孔(对于96孔板)或25uL /孔(对于384孔板)替换测定缓冲液(组分B)。
4.使用带DAPI过滤器的荧光显微镜拍摄图像。
参考文献
Plasma-activated medium selectively eliminates undifferentiated human induced pluripotent stem cells
Authors: Ryo Matsumoto, Kazunori Shimizu, Takunori Nagashima, Hiromasa Tanaka, Masaaki Mizuno, Fumitaka Kikkawa, Masaru Hori, Hiroyuki Honda
Journal: Regenerative Therapy (2016): 55--63
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